在自然界中乳糖僅存在于哺乳動物的乳中。牛乳中乳糖的含量一般為4.5-5.0%,平均為4.8%。季節、飼料、飼養管理條件對乳糖含量的影響極微。在乳牛泌乳期間,逐月擠得的混合牛乳中乳糖含量與平均值相差不大,一般僅相差0.1-0.2%,但當乳牛患有某種病癥如乳房炎、結核病等時,便會使其含量銳減。牛乳酸化變質時乳糖的含量也要降低。