甲硝唑，取裝量差異項下的內容物，混勻，精密稱取適量（約相當于甲硝唑50mg），置100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9→1000）約80ml，微溫使甲硝唑溶解，加鹽酸溶液（9→1000）稀釋至刻度，搖勻，用干燥濾紙濾過，精密量取續濾液5ml，置200ml量瓶中，加鹽酸溶液（9→1000）稀釋至刻度，搖勻，照分光光度法（中國藥典2000年版二部附錄Ⅳ A），在277nm的波長處測定吸收度，按C6H9N3O3的吸收系數E為377計算，即得。
膽紅素照高效液相色譜法（中國藥典2000年版二部附錄Ⅴ D）測定。
色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-氯仿-1%磷酸溶液（81：13：6）為流動相，檢測波長為449nm。理論板數按膽紅素峰計算應不低于1500。
對照品溶液的制備 精密稱取膽紅素對照品適量，加氯仿制成每1ml中含膽紅素8ug的溶液，即得。
供試品溶液的制備 取裝量差異下的內容物，研細，精密稱取適量（約相當于人工牛黃50mg），置50ml棕色量瓶中，加氯仿-甲醇-水-鹽酸(90：10：0.3：0.03)混合液約40ml，超聲提取15分鐘，取出，迅速冷卻至室溫，加上述溶劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。
測定法 精密量取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算，即得。