1.空腹血糖
多次檢測空腹血糖，血糖水平低于3.36mmol/l。
2.葡萄糖耐量試驗
低血糖患者及胰島素瘤患者多呈低血糖曲線。偶有正常值，僅在發作時才有低血糖發生。
3.血清胰島素及C肽測定
常用放射免疫分析法測定血清胰島素及C肽值，正常值為（14±8.7）μU/ml，C肽值為0.8～4.0mg/ml。胰島素瘤患者的胰島素值升高，可達160μU/ml以上，C肽值也相應升高。
4.禁食試驗
禁食24小時，血糖下降，出現低血糖癥狀。
5.腦電圖
長期低血糖出現腦病變者，腦電圖可呈慢波或其他異常改變。
6.肌電圖
遠端肌肉有去神經表現，運動單位數目減少。彌漫性去神經纖維，尖端及巨大運動單位放電，多相電位。