1.空腹血糖應多次檢測血糖，低血糖水平為3.36mmol/L(60ng/dl)。
2.葡萄糖耐量試驗低血糖患者及胰島素瘤患者多呈低血糖曲線。偶有正常值，僅在發作時才有低血糖發生。
3.血清胰島素及C肽測定常用放免分析法測定血清胰島素及C肽值，正常值為(14±8.7)μU/ml，C肽值為0.8～4.0ng/ml。胰島素瘤患者的胰島素值升高，可達160μU/ml以上，C肽值也相應升高。
4.禁食試驗禁食24h，血糖下降，出現低血糖癥狀，胰島素瘤患者不能耐受，多出現低血糖的一系列癥狀，應盡早結束試驗，勿要導致昏迷出現，以防腦損傷。
5.甲苯磺丁脲(D860，Tolbutamide)試驗靜注D8601g后15～20h時胰島素升高可達100μu/ml，此后2～3h處于低血糖水平，可引起患者嚴重低血糖癥，必要時應停止試驗，給予葡萄糖。功能性低血糖反應如常，胰島素瘤患者血糖下降明顯。
6.亮氨酸試驗為激發試驗，靜注亮氨酸150mg，血糖下降1.4mmol/L(25mg/dl)以上，提示胰島素瘤。口服左旋亮氨酸200mg/kg體重，口服前及服后10、20、30、40、50、60min，分別檢測血糖及胰島素，因亮氨酸可刺激胰島素分泌與釋放，服藥30～45min，血糖下降至50mg/dl(2.8mmol/L)以下時為陽性反應。
7.胰高糖素試驗為激發試驗，進食6～8h后，肌注胰高糖素1mg，正常人45分鐘血糖達高峰，2小時恢復正常。低血糖患者血糖高峰提前出現，2小時仍處于明顯低血糖水平。胰島素瘤患者在靜注胰高糖素5～30分時，其胰島素反應高峰在130μU/ml以上。正常人與非肥胖者多不高于100μU/ml。必須每5min采血1次，歷時30min，才能得到正確結論。