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  • 發布時間:2022-10-19 17:22 原文鏈接: 關于單克隆抗體制備脾細胞的選擇介紹

      1.材料

      (1)免疫過的血清抗體滴度高的Balb/c鼠。

      單克隆抗體制備流程

      單克隆抗體制備流程

      (2)1640培養液(3)2.5%FCS-1640營養液

      2.操作方法

      (1)拉頸或用CO2處死小白鼠。

      (2)將小鼠放于70%酒精中浸泡消毒,取出固定于板上,在無菌條件下取脾。

      (3)把脾放入5ml含有2.5%FCS的1640液中,冰浴下輕輕洗去脾上的紅血球。

      (4)用鑷子輕輕擠壓脾,做成脾細胞懸液,用毛細管將懸液移入小試管中。

      (5)直立小試管3min,使大塊的結締組織下沉,把細胞懸液移入離心管中。

      (6)以2.5%FCS—1640充滿離心管,并以400g離心7min~10min(與此同時應開始制備骨髓細胞)。

      (7)把沉淀用約10ml的新鮮培養液再懸浮。

      (8)重復⑹、⑺步驟。

      (9)計算細胞,以臺盼蘭染色用相差顯微鏡檢查,活細胞數應高于80%為合格。

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