關于單細胞凝膠電泳技術的基本原理介紹

　　單細胞凝膠電泳技術的原理是基于有核細胞的DNA分子量很大，在DNA超螺旋結構附著在核基質中，用瓊脂糖凝膠將細胞包埋在載玻片上，在細胞裂解液作用下，細胞膜、核膜及其他生物膜破壞，使細胞內的RNA、蛋白質及其他成分進入凝膠，繼而擴散到裂解液中，惟獨核DNA仍保持纏繞的環區附著在剩余的核骨架上，并留在原位。如果細胞未受損傷，電泳中核DNA因其分子量大而停留在核基質中，經熒光染色后呈現圓形的熒光團，無拖尾現象。若細胞受損，在堿性電泳液（pH>13）中，先是DNA雙鏈解螺旋且堿變性為單鏈，單鏈斷裂的碎片分子量小即可進入凝膠中，在電泳時斷鏈或碎片離開DNA向陽極遷移，形成拖尾。細胞核DNA損傷愈重，產生的斷鏈或堿易變性片段就愈多，其斷鏈或短片也就愈小，在電場作用下遷移的DNA量多，遷移的距離長，表現為尾長增加和尾部熒光強度增強。因此，通過測定DNA遷移部分的光密度或遷移長度就可定量測定單個細胞DNA損傷程度 。