固相萃取技術的分離模式有多種,具體使用哪種方法,主要取決于待處理樣品的相對分子質量(Mr)及樣品的性質。
1.選擇固相萃取應考慮的問題：
(1)待測物的化學性質:功能基團、能否離子化,是水溶性還是脂溶性。
(2)基質的性質:pH值、離子強度、是水還是有機溶劑。
(3)類似干擾物的性質。
(4)待測物在樣品中的濃度。
(5)分析的檢測限及靈敏度。
(6)待測物是否需要富集、純化。
2.固定相的選擇(根據相似相溶原則來選擇固定相)：SPE的固定相是樣品分離、純化的關鍵,由于固定相關系到SPE的重復性、回收率、靈敏度、特異性,因此SPE的吸附劑一直是人們關注的熱點。自SPE發明以來,聚合樹脂的樣品污染一直令人苦惱,1978年Waters公司發明了C18鍵合硅膠制成一次性小柱(Sep-pakR),具有很高的可靠性和穩定性,已廣泛應用于臨床生化檢驗。凡可用于HPLC的吸附劑均可用于SPE,包括近年來針對藥物濫用檢測的“designerphase”。吸附劑的選擇既要考慮樣品各組分與固定相的親和力、待測物與洗脫劑的作用力,還要考慮其通用性。就化學鍵合相而言,非極性鍵合相有C1、C2、C4、C6、C8、環己烷基、苯基、二苯基、C18等；極性和弱離子交換相有:氰基、二醇基、氨基、伯胺/仲胺基、丁酸基；強離子交換相有:丙磺酸基、苯磺酸基、季銨基等；吸附樹脂有:XAD-2、GDX、X-5。具有選擇專屬性的苯基磺酸可用于分離共平面連位羥基結構分子。對于生物樣品,大多溶解在水性物質里,待測物被離子化,用離子交換萃取分離極性很強的物質,非極性或弱極性分析物用R-P提取,正相萃取用于提取有機溶劑中的極性物質。吸附劑的用量必須保證從樣品中有效吸附所有的待測物,不保留基質成分,增加吸附劑的量可增大吸附能力,但同時也增大洗脫體積,使待測物稀釋,給干燥和定量帶來困難。因此在達到有效吸附的前提下用最小量的吸附劑。