十六、各位老師，有幾個關于多聚賴氨酸包被培養板的問題請教
1、pll到底溶于硼酸緩沖液還是溶于三蒸水或雙蒸水
2、使用前是用滅菌的去離子水稀釋嗎，可不可以用雙蒸水或別的
答：多聚賴氨酸溶于硼酸緩沖液或者無菌培養用水；
多聚賴氨酸包被培養板使用前是用滅菌的去離子水稀釋，最好不要用雙蒸水或別的，因為多聚賴氨酸包被的原理是通過改變器皿表面的電荷而促進細胞的黏附。
十七、請問：多聚賴氨酸包被培養板和培養瓶時，該注意什么問題？
答：我的方法是：濃度為50ng/1ml的多聚賴氨酸，加入培養板或培養瓶能均勻覆蓋底部就可，放置在無菌操作臺中過夜。第二天早上用時先用雙蒸水沖洗三遍再用。
十八、我的問題是多聚賴氨酸可以在培養瓶中放多長時間，太長了會有影響嗎？
答：我曾用過多聚賴氨酸包被培養瓶,但濃度是0.1mg/ml,我都是放一夜,第二天吸掉晾干就用,當然要紫外消一下.我覺得時間長點沒什么大礙。
我們這里的老師說，多聚賴氨酸不能用紫外線照射。
1.用賴氨酸包被培養板和培養瓶時，應該選用多聚左旋賴氨酸(分子量為15-30萬) ；
2.感覺你“濃度為50ng/1ml”有些低，我一般最后多聚賴氨酸使用濃度達到20－30ug/ml；
3.包被時間一般為6－7h，或者過夜也可；
4.使用時應該先用滅菌水洗三次＋PBS（起平衡鹽作用）洗一次，洗液的量應該大于包被液的量；
5.“多聚賴氨酸可以在培養瓶中放多長時間，太長了會有影響嗎？”，我包被時間最長的經歷 有過48h,最后只是多聚賴氨酸隨著時間延長蒸發一些而量變少了，但是對細胞生長并無大礙，這是我曾經有過的經歷，所以我會負責地告訴你；
6.“多聚賴氨酸能在4度冰箱里放多久？”，最好置于－20度保存，放置數月乃至半年都可以。
我問過博士德公司，他們分裝的多聚賴氨酸是用來作免疫組化的，沒有做過細胞培養實驗，他們不保證能否用在細胞培養中，建議你買其他公司的吧，有固體的，分子量為15-30萬，我們實驗室用濃度0.01%的來促進神經細胞貼壁。
我們用的多聚賴氨酸濃度為100ug/ml,一般包被3-4小時即可用.我們包被完后一般放在培養箱里,臨用時拿出來洗三次，吹干即可．如果不急著用，放在培養箱里較長時間也沒關系，把瓶蓋擰緊即可，我最長放了２星期也沒有問題。
左旋和右旋的多聚賴氨酸都可以用于包被細胞培養器具,主要看你的細胞貼壁能力如何,左旋的更利于細胞貼壁.我們一般使用0.01%濃度的,包被過夜,第二天用雙蒸水洗兩三次,超凈臺紫外照射,風干。可以直接買sigma的原裝粉劑自己配。還有,配好的多聚賴氨酸在4度時間不能放置太久,大概就一兩周吧。存放于-20度中的一般為0.1%的,而且不能反復凍融,只能融化一次。最好是配好后分裝。
十九、多聚賴氨酸可用蒸餾水或PBS配制嗎？
答：可以的，我們這兒基本上都是用去離子水配制的，這幾種方法效果差不多。不知道你是用來做什么的，免疫組化還是養細胞？ihc沒什么特別說明，如果是包被瓶皿，那就要注意無菌操作，還有有些普通的多聚賴氨酸加有防腐劑，對細胞有影響的！！
（注：sigma公司的產品有注明：used to coat tissue culture surfaces。購買時要注意）
如果是浸泡材料后直接接種細胞的話（多聚賴氨酸有利于細胞帖壁），我建議你用PBS,因為PBS平衡鹽，對細胞損傷小。如果配制后是用來加入培養基的（只是作為其中的一種成份），可以用三蒸水。
說明書上要求配制及存放要在塑料制品中，忌玻璃制品，用PBS稀釋。