1.新生兒期篩查
通過對新生兒進行群體篩查不僅可以達到早期診斷和治療的目的，還可以為遺傳咨詢和計劃生育提供資料，大多數篩查中心都選用兩種方法：Beutler試驗和Paigen試驗。
2.尿液中還原糖測定
對有疑似癥狀的患兒都必須及時檢查其尿中是否含有還原糖，且在定性試驗陽性時，進一步采用濾紙或薄層層析方法進行鑒定。
3.酶學診斷
外周血紅、白細胞、皮膚成纖維細胞，或肝活檢組織等均可供測定酶活性之用，以紅細胞最為方便，本病純合子患兒的酶活性缺如或甚低；雜合子攜帶者的酶活性則為正常人的50%。
4.常規檢查
常規做X線、B超等檢查，裂隙燈檢查，以及腦電圖檢查。
5.其他檢查
必要時應檢測肝功能、凝血機制、血糖、血電解質和血、尿培養等項目以利診斷。