現代尿液分析除了理學檢驗、化學檢驗外,最重要的是對尿中表形成分的顯微鏡檢查。尿中主要有形成份的各種形態參見附圖。但是對于理學檢驗結果正常、中性粒細胞酯酶和亞硝酸鹽試帶法結果陰性的尿液,其顯微鏡檢查的價值已被提出了質疑。如有學者提出,試帶法結果若符合下列條件就可不做顯微鏡檢查:①白細胞陰性,②紅細胞陰性,③蛋白質陰性,④亞硝酸鹽陰性。美國臨床檢驗標準委員會(NCCLS)規定凡有下述情況的應進行顯微鏡檢查:①醫生提出鏡檢要求的。②檢驗科規定的患者(如泌尿科、腎病科患者、糖尿病尿者、應用免疫抑制劑患者及妊娠婦女)。③任何一項理學、化學檢驗結果異常的。在尿沉渣顯微鏡檢查方法的規范化方面,近年各國又展開了廣泛的實驗研究,并推出了一系列的操作規程。
一、尿沉渣顯微鏡檢查的規范化比較
1991年,美國NCCLS提出了“尿液常規分析”的推薦標準(GP16-P),經過四年的實踐,于1995年推出了“尿液分析和尿液標本采集、轉運和保存”的標準文件(GP16-A),其中第五部分“尿液顯微鏡檢查”作了規定。日本臨床檢驗標準委員會(JCCLS)也在1995年提出了“尿液沉渣 檢查”的標準文件(GP1-P2),兩種文本主要內容的比較見附表。
我國在80年代曾提出過尿液沉渣顯微鏡檢查的規范,并在1995年的中華醫學檢驗學會臨床血液學檢驗與尿分析專題研討會上進行了修訂,其操作規程主要內容為:取尿液10ml,以相對離心力400g,離心5分鐘,剩余沉渣液0.2ml,混勻吸沉淀物20μl,滴入載玻片上,用18mm×18mm蓋玻片覆蓋后鏡檢,先用低倍鏡(10倍目鏡×10倍物鏡)觀察全片,再用高倍鏡(10倍目鏡×40倍物鏡)仔細觀察,細胞成分需觀察10個高倍視野(HP),管型需觀察20個低倍視野(LP),報告方式:XX個細胞/HP,或XX個管型/LP。同時建議逐步使用一次性專用的尿沉渣 定量檢測板,采用XX個細胞(或管型)/μl的報告方式。1997年,中華人民共和國衛生部醫政司又出版了《全國臨床檢驗操作規程》第二版,對于尿沉渣檢查作了具體的規定。由此可見,對于離心的尿量、蓋玻片和載玻片大小、顯微鏡視野大小、觀察視野數、結果報告方式等,我國和美國、日本等國均已作出了相應的規定。雖然各國的規定存在一定的差異,但相同的主要目的都是使尿沉渣顯微鏡檢查的操作規范化,使結果更精確、更準確、更具有可比性、更符合患者和臨床實際。
附表 尿沉渣顯微鏡檢查規范操作比較
NCCLS | JCCLS | 中國 | |
標本要求 標本量 離心管 離心機要求 離心時間 離心力 留取沉渣量 檢查量 載玻片和蓋玻片規格 顯微鏡要求 鏡檢觀察要求 染色要求 結果報告方式 | 推薦晨尿,放置時間不超過2小時 10ml,12ml,15ml 透明的、塑料或玻璃的、帶刻度的、有蓋的、尖底的一次性試管 帶自動鎖蓋的、恒溫的、水平式離心機 5分鐘 400g(其中,半徑是指離心機中軸至離心管底部的距離) 依照廠商的產品而定 依照廠商的產品而定 依照廠商的產品而定 普通光學顯微鏡 推薦采用濕片法 推薦活體染色 推薦采用每毫升尿有形成分數量來表示 | 推薦放置時間不超過2小時 10ml 透明的、塑料或玻璃的,帶10ml、0.2ml刻度尖底試管 水平式離心機 5分鐘 500g(其中,半徑是指離心機中軸至離心管底部的距離) 0. 2ml 15μl 75mm×26mm, 18mm×18mm 普通光學顯微鏡 推薦采用濕片法,觀察視野數目20-30個,不少于10個 不必采用染色以視野均值報告 | 推薦晨尿,放置時間不超過1小時 10ml 帶刻度離心管 5分鐘 1500r/min 0. 2ml 20μl 18mm×18mm 普通光學顯微鏡 推薦采用濕片法,觀察視野數目,細胞成分為20個高倍視野,管型為10個低倍視野 細胞成分以每高倍視野最低至最高值報告;管型以每低倍視野均值報告 |
二、尿沉渣顯微鏡檢查應引起注意的問題
1. 標本問題 尿沉渣鏡檢通常推薦采用晨尿,原因是晨尿最濃縮、能最大程度的反映有形成分的情況。近年,有學者提出采用晨間第二次尿液,即留取早上8點至9點鐘尿液,避免因標本室溫存放時間過長、細菌生長、蛋白分解、氨升高而使細胞、管理等有形成分破壞。
2. 染色問題 有的推薦采用活體染色,如Sternheimer-Malbin染色、0.5%甲苯胺藍染色,有助于細胞和管型的鑒別。對于尿中脂肪和結晶的鑒別,推薦采用偏振光顯微鏡,亦可用特殊染色,如脂肪、卵圓脂肪小體的油紅O、蘇丹Ⅲ染色。細菌的革蘭、巴氏染色,嗜酸性粒細胞的Hansel染色、Wright、Giemasa染色、巴氏染色,含鐵血黃素顆粒的普魯士藍染色等。有的認為尿沉渣檢查不必染色,因為有些染液會引起溶血,或因大量染液而稀釋標本。
3. 使用標準化尿沉渣檢查器材的問題 目前,推薦采用商品化沉渣檢查器材的呼聲越來越高,原因是這些裝置具有檢查尿量、離心力、離心時間、留取沉渣量、檢查量、報告單位等統一的特性,可保證檢查結果的精密度、準確度良好。
4. 顯微鏡檢查和結果報告問題 有的推薦顯微鏡檢查應在較弱光線下進行,這較容易觀察管型(如透明管型)和異形紅細胞,當發現可疑成分時要由高級檢驗員復核。所有的顯微鏡檢驗結果必須和理學、化學檢驗結果符合,反之亦然。若存在不一致的結果,應在最終報告之前解決這類問題。
總之,尿液沉渣顯微鏡檢查至今仍是一項非常有價值的臨床試驗,其檢查操作的規范化將有利于臨床疾病診斷和療效觀察,應使臨床醫師充分認識和配合,更應引起檢驗科工作人員高度重視和認真執行。
上海市臨床檢驗中心 胡曉波