1903年3月21日俄國植物學家茨維特（Michael Tswett，1872-1919）在華沙自然科學學會生物學會議上發表了“一種新型吸附現象及其在生化分析上的應用”研究論文，介紹了一種應用吸附原理分離植物色素的新方法，并首先認識到這種層析現象在分離分析方面有重大價值。1906年他在德國植物學雜志發表文章，首次命名上述分離后色帶為色譜圖，稱此方法為色譜法（Chromatography）。1907年在德國生物學會年會上，展示過帶有色帶的分離柱管和純化過的植物色素溶液。茨維特被世人公認為色譜創始人。
德籍奧地利化學家R.Kuhn 等利用他的方法在纖維狀氧化鋁和碳酸鈣的吸附柱上將過去一個世紀以來公認為單一的結晶狀胡蘿卜素分離成a 和b 兩個同分異構體，并由所取得的純胡蘿卜素確定出了其分子式。 Kuhn正是由于在維生素和胡蘿卜素的離析與結構分析中取得了重大研究成果而獲得了1938年諾貝爾化學獎。
1952年，Martin和James發表第一篇氣液色譜論文，首次用氣體作流動相，配合微量酸堿滴定，發明了氣相色譜，它給揮發性化合物的分離測定帶來了劃時代的革命 [1] 。