1、明膠酶譜法實驗步驟：取對數期的癌細胞在的無血清培養基DMEM中培養24h。
2、明膠酶譜法實驗步驟：次日收集上清液，將上清液移入離心管中 2000rpm 離心10min，-70℃儲存備用。
3、明膠酶譜法實驗步驟：根據細胞計數調整各組細胞培養上清液中的蛋白濃度（或者測定蛋白濃度調整使所上蛋白總量一致）。與5×上樣緩沖液混合，12ul樣本+4ul上樣緩沖液。（不要用槍用力吹打，防止出現過多氣泡）
4、明膠酶譜法實驗步驟：配制分離膠和濃縮膠，16ul/孔上樣（根據表達強度和蛋白濃度確定上樣量），4℃進行SDS-PAGE 電泳100V約1.5小時（電泳時在周圍敷上冰，有利于使條帶跑直）。
5、明膠酶譜法實驗步驟：電泳結束后,將凝膠置于洗脫液(2.5% Triton X-100，50mmol/L Tris -HCl ，5mmol/L CaCl2，pH7. 6) 中振蕩洗脫2次,每次40分鐘,然后用漂洗液(除不含Triton X -100 外其余同洗脫液) 漂洗2次,每次20分鐘,接著,將凝膠置于孵育液( 50mmol/L Tris -HCl , 5mmol/L CaCl2 , 0. 02% Brij-35 ,pH7.6) 中37℃ 孵育42h。
6、明膠酶譜法實驗步驟：孵育結束后經染色液(0.05% Coomassic 亮藍、30%甲醇、10%乙酸) 染色3h,及脫色液A、B、C(甲醇濃度分別為30%、20%、10 % ,乙酸濃度分別為10 %、10 %、5%) 分別脫色0.5、1、2h后，顯示出MMP-2（72KD） 和MMP -9（92 KD）為位于藍色背景上的透亮帶，用凝膠圖像分析系統分析讀取條帶面積，寬度和灰度值，做統計分析。