1.周圍血象
白細胞總數大多增高（10～20）×109/L，少數可高達（60～80）×109/L，分類以中性粒細胞為高。
2.涂片檢查
取水皰內容物、病灶滲出物、分泌物、痰液、嘔吐物、糞便、血液及腦脊液等作涂片，可發現病原菌，涂片中發現病原菌時可作革蘭或莢膜染色，亦可作各種特異性熒光抗體（抗菌體，抗莢膜、抗芽胞、抗噬菌體等）染色檢查。
3.培養
檢材應分別接種于血瓊脂平板、普通瓊脂平板、碳酸氫鈉平板。血標本應事先增菌培養。如見可疑菌落，則根據生物學特征及動物試驗進行鑒定，如青霉素串珠和抑制試驗、噬菌體裂解試驗等。
4.動物接種
取患者的分泌物、組織液或所獲得的純培養物接種于小白鼠或豚鼠等動物的皮下組織，如注射局部處于24小時出現典型水腫，動物大多于36～48小時內死亡，在動物內臟和血液中有大量具有莢膜的炭疽桿菌存在。
5.鑒定試驗
用以區別炭疽桿菌與各種類炭疽桿菌（枯草桿菌、蠟樣桿菌、蕈狀桿菌、嗜熱桿菌等），主要有串珠濕片法、特異性熒光抗體（抗菌體、抗莢膜、抗芽胞、抗噬菌體等）染色法，W噬菌體裂解試驗、碳酸氫鈉瓊脂平板CO2培養法、青霉素抑制試驗、動物致病試驗、莢膜腫脹試驗、動力試驗、溶血試驗、水楊酸苷發酵試驗等。
6.免疫學試驗
有間接血凝法，ELISA（酶聯免疫吸附實驗）法、酶標-SPA法、熒光免疫法等，用以檢測血清中的各種抗體，特別是莢膜抗體及血清抗毒性抗體，一般用于回顧性診斷和流行病學調查之用。阿斯可里沉淀試驗，對已腐敗或干涸的標本，作細菌培養有困難時可采用本試驗。如患者、病畜的病灶痂皮、尸體組織及血液、染菌的皮毛及其制品等標本，加水經煮沸或高壓提出抗原成分與炭疽沉淀素血清作環狀沉淀試驗，以間接證明有無炭疽桿菌感染，但本法常出現一些假陽性，對其結果判定應慎重。