環絲氨酸可用發酵法或直接合成法制備。發酵法產生菌是賴氏放線菌(Actinomyceslaven-dulae),發酵培養基為糊精;葡萄糖;淀粉;黃豆餅粉;酵母粉;硫酸銨;硝酸銨;碳酸鈣;氯化鈉;硫酸鎂和豆油等。合成法是將β-氨基氧丙氨酸乙酯二鹽酸鹽和氫氧化鉀反應,即環合得到環絲氨酸。