須依靠流行病學史、典型臨床表現和實驗室檢查。注意當地有無病毒性疾病流行、接觸史及預防接種史等。病毒性感染可由多種病毒引起，但臨床表現均有畏寒、發熱、全身倦怠無力、食欲減退等全身中毒癥狀及受侵組織器官炎癥的表現。受侵組織器官不同而可引起不同癥狀。此外，還須注意一些有診斷意義的特殊體征，如麻疹患者的麻疹黏膜斑（科普利克氏斑）、狂犬病患者的恐水征等。常規實驗檢查，末梢血白細胞一般均降低，淋巴細胞增多。同時多數病毒性疾病均為自限性，即病程1～2周后可不治自愈。根據以上特點可以作出初步診斷。確診須依靠病毒分離和血清學檢查。病毒分離可用組織培養、雞胚和動物接種。應用電鏡、免疫電鏡、免疫熒光法、酶聯免疫法及放射免疫法等可直接檢查標本中的病毒顆粒及病毒抗原，常用作快速和早期診斷，如糞便中的甲肝病毒和輪狀病毒的顆粒可用電鏡和免疫電鏡檢出。血清學檢查可用免疫擴散法、補體結合試驗、血凝法（間接血凝法和反向被動血凝法）、免疫熒光法、酶聯免疫法及放射免疫法等測定血清和體液中的特異性抗體。檢測抗原有助于早期診斷。檢測抗體，一般須檢測急性期和恢復期雙份血清，恢復期血清抗體滴度較急性期血清升高4倍以上才有診斷意義。檢測特異性IgM抗體有助于早期和現癥患者的診斷。近年來，應用分子雜交技術和聚丙烯酰胺凝膠電泳法診斷病毒性疾病，不僅有很高的敏感性和特異性，而且可以診斷不同型和株的病毒感染。此外，應用單克隆抗體檢測病毒抗原，也大大提高了診斷病毒性疾病的敏感性和特異性，而且用作對病毒抗原結構的研究。