1.詳詢病史，包括有無過敏史，詳細檢查全身及眼部情況，嚴重的心、肝、腎疾病及眼部屈光間質混濁者不宜造影。
2.詢問有無青光眼病史，必要時應進行檢查。由于青光眼不能散瞳，因此造影也就無從談起。
3.提前30至60分鐘開始散瞳，被檢眼要充分散瞳，使瞳孔直徑能達8mm為宜。至少要達到7毫米以上。
4.造影前30min給患者服抗過敏藥，如撲爾敏或異丙嗪，止吐劑如維生素B6或甲氧氯普胺（滅吐靈）。
5.準備10%熒光素鈉溶液5ml或20%溶液3ml，熒光素鈉稀釋液（無菌生理鹽水4.5ml加于10%熒光素鈉0.1ml內）抽入空針內備用。
6.將照影機準備妥當，頭部固定，位置調整合適。在注射熒光素鈉之前先攝眼底普通照相及加用激發濾光片和柵濾光片的對比照相。
7.在患者肘部常規消毒后作靜脈穿刺，用針頭先緩慢注入熒光素鈉稀釋液，在統一口令下快速注入（2s～4s）并同時啟動計時，約5秒后開始拍照。
8.告知患者在24h內尿液呈黃綠色，是排出的藥液，不必恐懼，可多喝水以利排藥。
9.為預防意外，造影檢查須備有必要的急救藥品如腎上腺素、氨茶堿、氫化可的松注射液及器械，如血壓計、聽診器、氧氣筒、開口器、輕便手持復蘇器、靜脈輸液器等。一旦需要，可立即取用。