1、羅托綜合征的血清學檢查：
血清總膽紅素在68.4～119.7μmol/L之間波動，70%～80%為結合膽紅素。若肝細胞攝取非結合膽紅素障礙，以非結合膽紅素占優勢。
2、羅托綜合征的磺溴酞鈉試驗：
每千克體重靜脈注射磺溴酞鈉5mg，正常肝臟在45分鐘后大部分排出，血清中的色素應不超過注射量的5%。羅托綜合征的特征性改變為注射磺溴酞鈉45分鐘后的平均潴留值為46%±8%，有時可達98%，但無第2次高峰現象。
3、羅托綜合征的吲哚氰綠排泄試驗：
吲哚氰綠靜脈注射入人體后，在血液中與血清蛋白結合，隨血循環迅速分布到全身血管內，隨后被肝臟攝取，正常情況下在97%吲哚氰綠在注射20分鐘后排除體外，本征則顯示吲哚氰綠潴留明顯增加。
4、尿糞卟啉：
尿糞卟啉總量＞610mmol/24h，先天性非溶血性高結合膽紅素血癥I和Ⅲ型異構體分布正常。