（一）激素測定：
絕大多數功能性垂體瘤常分泌單一激素，垂體前葉激素及靶腺激素測定多能在早期作出定性診斷。
注意：
（1）垂體激素的基礎值易受內外環境、藥物和周期節律的影響。
（2）單一垂體腺瘤，血中激素升高可能不限于一種，這種現象未必表示混合型腺瘤，除非兩種激素均明顯增高。
（3）激素值與腺瘤的大小及臨床癥狀未必平行，后者取決于病程的長短、激素的類型、瘤體有無退行性變和囊性變以及其他影響激素活性的物質等。因此激素測定應多次反復進行，必要時須作激素的興奮和抑制試驗。
（二）定位診斷：
1、蝶鞍X線檢查，垂體瘤較大時平片可見蝶鞍擴大、鞍底下移、鞍背骨質破壞。
2、垂體CT掃描，能發現直徑3mm以上的微腺瘤。
3、核磁共振對垂體瘤定位十分精確。