采用人工化學合成的方法,即通過分離天然芋螺毒素后測序或采用基因克隆方式獲得芋螺毒素序列,然后采用人工化學合成獲得更多量的芋螺毒素,較多使用的是多肽固相合成法。與傳統的多肽液相合成法相比,該法具有如下優越性:只需經過過濾和沖洗,就可以將產物多肽從可溶性試劑中分離開來;易于使用自動化設備;過量的反應試劑促使反應徹底進行;反應產物多肽一直結合在固相載體上,損失量將達到最小。根據氨基端保護基的不同,固相合成芋螺毒素常用方法為Fmoc法和Boc法。Fmoc法具有反應條件溫和、副反應少等特點,大多芋螺毒素的合成都采用該方法。合成后將肽鏈從樹脂上裂解下來,常用的裂解劑為reagentK試劑(trifluoroaceticacid∶water∶ethanedithiol∶phenol∶thioanisole,90∶5∶2.5∶7.5∶5)。接著脫去側鏈保護基、復性、純化,即可得到與天然毒素活性相同的肽,也可以合成其同系物進行結構和功能的研究。但由于ω-芋螺毒素氨基酸殘基較多,一般都在25個以上,其人工合成的產率較小,純度也低,合成的肽還需氧化折疊才能形成正確的構象。氧化折疊的方法有空氣氧化法、DMSO、DTT/cysteine、gluthatione氧化法等。 [78-82]
研究人員在合成ω -CNVIIA時,對這幾種氧化折疊方法作了比較,發現gluthatione氧化法效果最好。隨后進行純化,即可得到具有天然毒素活性且純度較高的多肽,最后利用NMR技術進行構象分析。因此,人工合成芋螺毒素的成本較高,還不能完全滿足作為藥物商業化生產的要求。但由于芋螺毒素藥物的用量小,效果好,價值高,可部分滿足市場需求。