(1)、各試劑成分的終濃度:磷酸鹽540mmol/L,α-酮戊二酸10mmol/L,NAD-PH 120μmol/L,ADP0.5mmol/L,GLDH16U/ml。
(2)、酶法測定血漿氨具有特異、簡便、快速等優點,且可上自動分析儀。腺苷二磷酸(ADP)可穩定GLDH,增強反應速率。NADPH作輔酶較NADH可縮短反應時間,但前者價格更貴。
(3)、血漿中LDH、AST等也可利用NAD(P)H而產生內源性的消耗,直接影響血漿氨測定結果,起動劑α-酮戊二酸加入前37℃加溫10min為NAD(P)H內源性消耗反應時間。
(4)、血漿氨測定的準確性在很大程度上取決于標本收集是否符合要求。用EDTA·Na2抗凝,靜脈采血與抗凝劑充分混勻后立即置冰水中,盡快分離血漿,加塞置2-4℃保存,在2-3h內分析;-20℃可穩定24h,顯著溶血者不能用,因紅細胞中氨濃度為血漿的2.8倍。
(5)、線性范圍0-150μmol/L,日常工作中可僅用100μmol/L標準應用液。
(6)、如測定值超出線性范圍,可用去氨水稀釋血漿后重作。
(7)、血氨含量甚微,要防止環境及所用各種器皿中氨的影響。
(8)、國內已有血漿氨酶法測定試劑盒,請按說明書操作。如中生公司的試劑盒,用三乙醇胺緩沖液,NADPH作輔酶,NADPH內源性消耗反應在室溫中需反應20min。