利用高劑量的X射線將候選染色體打斷成若干片段，含有這種片段的細胞可與倉鼠細胞形成雜交克隆。在這種雜交中，人類染色體片段被插入到倉鼠染色體的中間部分，因此大部分克隆片段在進行有絲分裂時處于穩定的狀態。利用類似于遺傳重組原理和最大似然性的統計學方法來計算存在于DNA片段上的多態性或非多態性標記之間的斷點頻率，以此估計標記之間的距離，并建立人類基因組拷貝庫---體細胞雜交系統。可根據不同要求構建出斷裂程度不同的多套拷貝，從而得到不同分辨率的放射雜交圖。總之，輻射性雜交是建立在受到X射線照射的供體細胞與非放射線處理的受體細胞融合基礎上的一種體細胞遺傳學方法，是利用兩個標記之間被X射線打斷的概率來計算標記之間距離，通過類似于減數分裂連鎖制圖的方法來確定標記之間的順序。