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  • 發布時間:2020-07-21 19:08 原文鏈接: 關于食品化學分析中HPLC方法

      自HPLC儀問世以來,其硬件技術、分析方法及應用研究發展迅速。本文僅就在食品化學分析中,HPLC分析技術與應用進展概述如下。

      HPLC分析方法進展

      ● 液-固色譜法(LSC) LSC是根據組分基團對吸附劑表面親和力的大小,決定了其保留程度。在LSC色譜中應用廣泛的極性固定相是硅膠。

      ● 反相色譜法(RPC) RPC是指在非極性固定相上的液相色譜法,固定相多為化學鍵合相。其代表為ODS。目前,某些極性鍵合相,如氨基鍵合相也廣泛應用于反相色譜中。反相色譜可分離離子型和非離子型化合物。據統計,在食品化學HPLC分析中,90%以上的分析過程都是反相色譜法。

      ● 離子對色譜(IPC) IPC又稱為離子對分配色譜,是近年來發展較快的一種色譜技術。目的是應用液-液分配色譜實現對強電解質和弱電解質混合物,或對電解質和非電離物質混合物的分離。IPC根據固定相和流動相的相對極性分為正相和反相方式,但反相IPC應用較多,如氨基酸、多肽、核酸、各種藥物、有機酸的分析。

      ● 離子色譜法(IC) IC法是HPLC中用于分離分析離子型化合物的方法,按分離機理的不同,IC可分為高效離子交換色譜法(HPIC)、高效離子排斥色譜法(HPICE)和流動相離子色譜法(MPIC)。HPIC主要用于親水陰、陽離子和碳水化合物的分離;HPICE多用于無機弱酸、有機酸、氨基酸、醛、醇的分離;MPIC可用于疏水性陰、陽離子和過渡金屬配合物的分離。IC分析多種陰離子快速、靈敏、選擇性好。目前許多國家建立了采用IC法測定水質中陰、陽離子的標準檢驗法;AOAC已批準四項用于食品分析的IC法。

      ● 反相膠束色譜法(RPMC) 在反相離子對色譜中,當反離子采用表面活性劑超過一般離子對色譜所用的濃度時(達0.02~0.2mol/L),此時的反相色譜稱為RPMC。RPMC分為正反相膠束色譜。特點是具有高度的選擇性,有利于梯度洗脫,提高了檢測靈敏度。主要應用于血清、尿液中藥物濃度測定,其優點是樣品可直接進樣分析,分析時間短,樣液量少,準確度高。

      ● 空間排阻色譜法(SEC) 又稱為體系排阻色譜法,是利用多孔凝膠固定相,依據分子大小差異來進行分離的方法。根據凝膠性質可分為凝膠過濾色譜法(GFC)和凝膠滲透色譜法(GPC)。SEC適用于需很快提供未知樣品分子大小、組成、近似分子量信息。GFC適用于分析水溶液中多肽、蛋白質、核苷酸、多糖等;GPC主要用于高聚物的分子測定。如聚乙烯、聚氯乙烯等精細化工原料。

      ● 間接光度液相色譜法 間接光度液相色譜檢測技術是一項正在發展中的色譜技術,在離子和離子對色譜中都有應用。該法是對于無紫外吸收的樣品采用UVD來檢測的方法。優點是擴大UVD的應用范圍,可用于低響應或無響應的樣品。多用于無機和有機陰離子的測定。。

      ● 化學衍生液相色譜法 它是采用衍生試劑,借助化學反應給樣品組分化合物分子接上某個特殊基團,使其衍生物能夠改善分離效果和提高檢測靈敏度的方法。可分為柱前和柱后衍生法。衍生試劑有多種,可與胺類、氨基酸、酚、醇等發生衍生化反應。

      文章鏈接:儀器設備網 https://www.instrumentsinfo.com/technology/show-2482.html


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