（1）樣品處理
牛奶樣品：將50ml含脂牛奶降溫至10℃以下，3500r/min離心10min，用吸管吸棄上層脂肪層，取下層牛奶液 作為待測液。奶粉樣品：稱取5g奶粉于100ml三角瓶中，加入50ml蒸餾水振搖5～10min混勻，以下步驟同上述牛奶樣品處理方法。
（2）試劑準備
抗體：將小分子量的AFM1通過化學合成偶聯一高分子量的蛋白（BSA，OV，KLH等），制備完全抗原，然后免疫家兔2～3個月，期間加強免疫3～5次，最后從家兔血液中提取抗AFM1的免疫球蛋白（即多克隆抗體）。
酶標抗原：將AFM1通過化學合成，在“橋連劑”的作用下結合上酶蛋白（常用辣根過氧化物酶），經提純后冷凍干燥得到AFM1酶結合物。
（3）檢測
將抗AFM1抗體包被于微孔板上，4 ℃過夜，封閉；每孔中加入AFM1標準溶液或樣品待測液，然后加入AFM1酶結合物，37℃反應30min；洗板后每孔中加入酶基質和顯色劑，37℃顯色15min；目視法或儀器法測定；通過繪制標準曲線計算樣品中AFM1的含量。