(1) 做OGTT試驗前3天，停止胰島素治療，可正常飲食，每天飲食中碳水化合物含量不應低于150克(但要控制在250-300克范圍)，并且維持正常活動。
(2) 次日晨空腹抽取血液2ml，抗凝，測定血漿葡萄糖，此為空腹血糖。
(3) 在5分鐘之內飲入300毫升含75克葡萄糖的糖水(對于兒童則中按每千克體重給1.75克葡萄糖，計算口服葡萄糖用量，直至達到75克葡萄糖時止)，喝糖水后30分鐘、1小時、2小時分別靜脈取血一次，并留取尿液做尿糖定性試驗。整個試驗中不可吸煙、喝咖啡、喝茶或進食，應安靜地坐在椅子上。
(4) 測定血糖濃度，并繪制耐糖曲線：將各次所測得的血糖濃度與對應的時間作圖，繪制糖耐量曲線。