最近年來在枯草桿菌，鼠傷寒沙門氏桿菌等細胞及噬菌體T4、T5、T7中分離到DNA聚合酶，這里只介紹T4DNA聚合酶。T4DNA聚合酶與大腸桿菌DNA聚合酶Ⅰ相似，也是一條多肽鏈，分子量亦相近，但 氨基酸組成不同，它至少含有15個半胱氨酸殘基。但是，它在作用上與大腸桿菌DNApol不同；[1]它無5'→3'外切酶活性；[2]它需要一條有 引物的單鏈DNA作模板。在有缺口的雙鏈DNA作模板時，需要有 基因32蛋白的輔助（基因32蛋白在T4DNA復制中的作用和大腸桿菌 單鏈結合蛋白的作用相似，基因32蛋白在 復制叉處和單鏈DNA結合后可以促進雙鏈的進一步打開，并保持其單鏈狀態有利于新生鏈的合成）；它利用單鏈DNA為模板進，可同時利用它作為引物，即此單鏈DNA的3'端能環繞其本身的某一順序形成 氫鍵配對，3'端的未雜交部分即被T4DNA聚合酶的3'→5'外切酶活性切去，然后在其作用下從3'-OH端開始聚合，合成該模板DNA的 互補鏈，再以互補鏈為 模板合成原來的單鏈DNA。