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  • 發布時間:2021-05-07 13:31 原文鏈接: 寫文章全自動生化分析儀與化學發光分析儀有何不同?

      什么是化學發光?

      之前的一篇文章,我們講了化學發光是免疫診斷的一種,是利用抗原抗體之間的特異性反應來測定體內疾病標志物濃度,從而判斷人體身體狀態的診斷方法,廣泛應用于傳染病、心臟疾病、腫瘤、妊娠檢測等。

      對于生化診斷來說,生化診斷測試的糖類,脂肪類等在人體內的含量普遍為g/L-μg/L水平。

      而對于化學發光來說,被檢測物質的濃度低,免疫診斷的對象抗原、抗體等僅為μg/L—pg/L水平, 造成對整個檢測系統的精密度要求高,儀器與試劑體系封閉;化學發光自動化難度高,對技術有更高的要求。

      目前主流的化學發光技術有直接化學發光(異魯米諾(新產業)、吖啶酯(雅培))、間接(酶促)化學發光(丹納赫、邁瑞、安圖)、電化學(羅氏),各有優劣勢。

      今天這篇文章我們主要來講講化學發光

      化學發光(chemiluminescence)是指伴隨化學反 應過程所產生的光的發射現象。某些物質(發光劑) 在化學反應時,吸收了反應過程中所產生的化學能, 使反應的產物分子或反應的中間態分子中的電子躍 遷到激發態,當電子從激發態回復到基態時,以發 射光子的形式釋放出能量,這一現象稱為化學發光。

      化學發光免疫分析的類型

      一.直接化學發光免疫分析

      用吖啶酯直接標記抗體(抗原),與待測標本中相應的抗 原(抗體)發生免疫反應后,形成固相包被抗體-待測抗原吖啶酯標記抗體復合物,這時只需加入氧化劑(H2 O2)和 NaOH使成堿性環境,吖啶酯在不需要催化劑的情況下分解、 發光 。 由集光器和光電倍增管接收、記錄單位時間內所產生 的光子能,這部分光的積分與待測抗原的量成正比,可從 標準曲線上計算出待測抗原的含量。

      二.化學發光酶免疫分析

      化學發光酶免疫分析(chemiluminescence enzyme immunoassay,CLEIA)是用參與催化某一化學發光反應的酶 如辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(ALP)來標記抗原或抗 體,在與待測標本中相應的抗原(抗體)發生免疫反應后,形成 固相包被抗體-待測抗原-酶標記抗體復合物,經洗滌后,加入 底物(發光劑),酶催化和分解底物發光,由光量子閱讀系統接 收,光電倍增管將光信號轉變為電信號并加以放大,再把它們 傳送至計算機數據處理系統,計算出測定物的濃度。

      (1) 辣根過氧化物酶標記的化學發光免疫分析

      該分析系統采用辣根過氧化物酶(HRP)標 記抗體(或抗原),在與反應體系中的待測標 本和固相載體發生免疫反應后,形成固相包 被抗體-待測抗原-酶(HRP)標記抗體復合 物,這時加入魯米諾發光劑、H2O2和化學發 光增強劑使產生化學發光。

      (2) 堿性磷酸酶標記的化學發光免疫分析

      該分析系統以堿性磷酸酶 標記抗體(或抗原), 在與反應體系中的待測標本和固相載體發生 免疫反應后,形成固相包被抗體-待測抗原-酶 標記抗體復合物,這時加入AMPPD發光劑, 堿性磷酸酶使AMPPD脫去磷酸根基團而發光。

      三.電化學發光

      電化學發光免疫分析 (electrochemiluminescence immunoassay, ECLIA)是以電化學發光劑三聯吡啶釕標記 抗體(抗原),以三丙胺(TPA)為電子供體, 在電場中因電子轉移而發生特異性化學發光 反應,它包括電化學和化學發光兩個過程。

      主流的發光技術各有千秋, Roche(電化學)在腫瘤項目上占優,雅培(吖啶酯)在傳染病項目上占優,而丹納赫(ALP)在甲功激素項目上占優。

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