實驗材料 冰凍切片
試劑、試劑盒 Tris·ClEDTA甘氨酸PBSSSC乙醇甲酰胺硫酸葡聚糖DTTNaCl
儀器、耗材 加濕盒水浴鍋培養箱
實驗步驟
1. 從冰箱中取出載玻片，平衡至室溫，再打開玻片盒。置載玻片于架中，浸泡于以50 mmol/l Tris·Cl（pH7.5）/5 mmol/l EDTA所配的鏈霉蛋白酶液中，放10 min。
2. 室溫下將載玻片浸于含2 mg/ml 甘氨酸的PBS中30 s，然后再于PBS中浸2次，毎次30 s。
3. 浸載玻片于新配的TEA緩沖液中5 min。
4. 在一個燒杯中，配足量TEA緩沖液以沒過載玻片。加乙酸肝至終濃度0.25%，迅速倒在載玻片上，晃動玻片架使液體充分混合，放置10 min。
5. 在2×SSC中洗載玻片2次，每次5 min。
6. 按順序經30%、60%、80%、95%和100%乙醇依次縵泡脫水，每次浸2 min，干燥切片并馬上用于雜交。
7. 沉淀標記的DNA或RNA探針。確定標記摻入的百分率（比活）并估計合成的探針量，并按最終每千堿基0.2 μg/ml 的濃度，估算雜交混合液的終體積，依此重懸探針沉淀。