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  • 發布時間:2019-12-18 16:37 原文鏈接: 冰凍切片實驗技巧(三)學會看片子

    這里指的是片子滑過刀片時就要辨別出質量的好壞,如果到鏡下才發現片子的缺陷那就無法挽救。

    1. 觀察片子的厚薄

    盡管冰凍切片機可以設置厚度,但人為辨別片子的厚度是否合適仍然很重要。片子太薄看起來象半透明的鏡紙,片子太厚看起來混濁、柔性差,對我來說,5-6um的片子較合適,象一張薄的打印紙。

    2. 片子破裂

    這種假象往往是組織塊冷凍過度所致,可以通過升溫來解決,含水量多的組織切片很容易破裂,必須升高到一個合適的溫度使裂開程度降到最小。水腫或血液組織經常有這種問題,活檢的腦組織也很明顯。下面的片子來源于腎腫瘤,含水量豐富,破裂也比較明顯,我覺得水性的腫瘤組織在常規溫度下冷凍將會變得異常的堅硬。

    我覺得組織破裂的過程同一塊濕布結冰一樣的道理,當你用刀去挑這塊濕布時它會自然彎曲,當濕布已經結冰時刀會將冰片弄裂。下面有6張片子,上面的3張破裂很明顯,底部的3張很輕微,你必須仔細看才能發現,如果在切片時你集中注意力,你能感覺到甚至聽到碎裂的聲音。


    3.片子上的條紋

    垂直于刀片的細條紋為刀片缺口所致,這往往是切到鈣化組織、針頭或縫線的結果。

    寬條紋,組織破碎或突然無法解釋的切片困難往往意味著組織粘在刀片下面了,這在脂肪組織比較常見,這時刀片需要取下來清洗干凈,注意清洗刀片時不要傷到自己。


    4.波浪線樣的橫皺

    這是切片機零件松動的征象,可能需要修理,切片時刀片有移動或支撐刀片的機子有移動時,往往有這種規則的條紋出現。為了獲得干凈整齊的片子,所有固定刀片、刀架、支撐臺、支撐栓子及切片機的旋鈕、螺釘、軸承都必須上緊,并且不帶有垃圾殘骸,支撐臺或刀片下面有一點包埋物都會影響切片的質量。


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