冰凍組織
PBSPFA蔗糖
1. 于4℃，在2%PFA固定液（做免疫組織化學時）或4%PFA固定液（做原位雜交時） 中，固定小的組織樣品或分離的胚胎（如第7、第8天的小鼠胚胎）30 min。
2. 在PBS中清洗組織樣品2次。
3. 在30%蔗糖中浸制樣品，直至組織沉下（1~3 h至過夜）。
1. 大的胚胎和一些組織，將需要固定達4 h，大的器官在由動物體解剖下之前，應在動物體內通過灌流進行原位固定。
2冰凍切片中，最常見的問題就是冰晶，防止冰晶，可以組織速凍或用不同濃度的蔗糖置換組織塊的水分，通常用20%蔗糖，也可用20%-25%-30%蔗糖梯度置換，另外在配置蔗糖液時不能用蒸餾水配制，否則起不到脫水作用。組織塊被蔗糖液浸泡時可析出許多水，因此要更換液體，直至組織塊沉底
