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  • 發布時間:2023-03-14 15:58 原文鏈接: 凋亡及細胞周期數據如何看

    1.X軸選擇FSC-A,Y軸選擇SSC-A。分析凋亡的細胞選擇上圖所示的細胞群體進行分析。細胞碎片不予分析。
    2.在SSC/FSC圖中雙擊“分析的細胞群體”,X軸選擇FITC,用來表示AnnexinV-FITC。Y軸選擇PE-Texas,用來表示PI。用四分門設門工具界定活細胞和凋亡細胞。

    Q1(UL):(AnnexinV-FITC)-/PI+,此區域的細胞為壞死細胞。也可能有少數的晚期凋亡細胞在其中,甚至機械損傷的細胞也包含其中。

    Q2(UR): (AnnexinV+FITC)+/PI+,此區域的細胞為晚期凋亡細胞。

    Q3(LR):(AnnexinV-FITC)+/PI-,此區域的細胞為早期凋亡細胞。

    Q4(LL):(AnnexinV-FITC)-/PI-,此區域的細胞為活細胞。

    通常統計細胞凋亡率時采用Q2+Q3,晚期凋亡+早期凋亡群(即所有AnnexinV陽性群)。

    細胞周期由G1期、S期、G2期和M期組成。細胞在G1期完成必要的生長和物質準備,在S期完成染色體DNA的復制,在G2期進行必要的檢查和修復,以保證DNA復制的準確性。在M期完成遺傳到子細胞中的均等分配,使細胞進行分裂。

    細胞周期檢測中PI最為常用。PI為插入性核酸熒光染料,能選擇性的嵌入核酸DNA和RNA雙鏈螺旋的堿基之間與之結合,其結合的量與DNA的含量成正比例關系,用流式細胞儀進行分析,就可以得到細胞周期各個階段的DNA分布狀態,從而計算出各個期的百分含量。

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