1.裝柱時要注意凝膠的流速,不宜過快,同時要保證凝膠能充分的沉淀且分布的比較均勻.
2.凝膠溶脹所用的溶液應與洗脫用的溶液相同,否則由于更換溶劑,凝膠體積會發生變化而影響分離效果.
3.樣品的濃度和加樣量的多少.是影響分離效果的重要因素.樣品濃度應適當大,但大分子物質的濃度大時,溶液的黏度也隨之變大,會影響分離效果,要兼顧濃度與黏度兩方面.加樣量和加樣體積越少分離效果越好,加樣量一般為柱床體積的1%-2%,制備用量一般為柱床體積的20%-30%.
(一)原理凡鹽析所獲得的粗制蛋白質(鹽析得到的IgG)中均含有硫酸銨等鹽類，這類將影響以后的純化，所以純化前均應除去，此過程稱為“脫鹽”(desalthing)。脫鹽常用透析法和凝膠過濾法，這兩種方法......
