凝血試驗的影響因素

前言

    首先，我們必須認識到，血栓與止血試驗結果錯誤的發生大多來自分析前，因此保證止凝血試驗標本的質量對實驗結果準確性的是非常重要的。

凝血檢測項目的標本準備

一、病人自身的準備及影響因素

二、標本采集

三、標本運輸及儲存

四、標本的處理

病人自身的準備及影響因素

1、年齡：以年齡不同所確定的參考范圍解釋新生兒和嬰兒的止凝血試驗結果非常重要，有很多學者報道了年齡與性別對血小板功能和凝血活性的影響。

2、身體狀態，疾病、月經期、妊娠期、貧血和紅細胞增多癥等。

3、藥物：國外學者曾研究了門診病人服用藥物對臨床檢驗項目的影響。用一種藥時,受藥物干擾的實驗占有的百分比為7 %;服用兩種藥時,百分比為16.17 %;服用三種或四種藥時,百分比為66.17 %;當病人服用5 種藥時,受干擾的實驗所占的百分比為100 %。

    當檢驗結果與臨床狀態不符且患者無其它并發癥，實驗室質控合格時， 可考慮一下藥物的影響。

各檢驗結果間的相關性上鑒別，如FIB與PT、APTT和TT之間，FDP與D-二聚體之間存在有一定的相關性，當這種相關性出現異常時，可考 慮一下藥物干擾。

4、生活習慣：吸煙可使血漿纖維蛋白原、vWF和其他凝血因子水平增加，并可使凝血酶生成及血小板激活增加； 要戒煙呀！

5、季節變化：清晨血小板最易激活，心肌梗死的發病率最高；寒冷季節，血凝活性增加，使心肌梗死和猝死的發病率增加。

6、ABO血型：O型血患者較其他血型患者血漿vWF和因子Ⅷ活性低。

標本的采集

1、患者在采血前應處于靜息狀態或抽血前有15-30分鐘的休息。 劇烈活動可激活血小板和凝血系統。

2、采血技術或采血過程的影響。采血應做到一針見血。當壓脈帶時間超過一分鐘，一方面引起血細胞和血凝蛋白濃度增高；另一方面可引起血凝系統因子Ⅷ和組織纖溶酶源激活劑（t-PA）釋放和活化。采集完畢后立即與抗凝劑混勻，同時要避免用力振搖。

3、采血的部位：標本采集嚴禁在輸液管中采血，特別是輸入肝素時或附近進行。

4、血凝管影響 血凝管的使用要標準化即使用硅化玻璃管，可避免內源性接觸途徑的激活。普通玻璃管影響最大的是Ⅷ因子的活性，可使其明顯降低。 醫院一定要選用質量合格的血凝管產品。

5、抗凝劑濃度的影響。美國國家臨床實驗室標準化委員會（NCCLS）的血凝實驗指南H21-A3推薦血凝試驗的抗凝劑為枸櫞酸鈉，配制濃度為3.13%(0.105mol/L)或3.2%(0.109mol/L)，它能有效地阻止因子Ⅴ和Ⅷ的活化。

血：抗凝劑（9：1）。

如果患者的Hct大于55%或低于20%應使用下述公式校正枸櫞酸鈉的用量：抗凝劑量（ml）=0.00185×血量(ml) ×（100-患者紅細胞比容）。

6、標本顏色的影響：

實驗表明：肝素、膽紅素、甘油三酯對試驗均有干擾,當血紅蛋白> 150mg/ L ,肝素> 1 mg/ L ,總膽紅素> 19.6mg/ dL ,甘油三酯> 1022mg/ dL時尤為顯著.

標本的運輸和儲存

1）、標本需要在室溫下運送，因低溫會損傷血小板，活化因子Ⅶ和因子Ⅺ，使PT，APTT結果縮短。

2）、新采集的標本，最好在2h內將血漿分離出來。

3）、當前不能做的標本，冷凍在-20℃的冰箱內。 

4）、需要存放較長時間的標本冰凍存于-80℃的冰箱內。

5）、冰凍的血漿融化時不能靜置于室溫中逐漸融化，這樣會有纖維蛋白遇冷沉淀蛋白析出，應放在37℃水浴中輕輕搖動，使其迅速溶化。

溫度與時間的影響：

    凝血因子中，以因子Ⅴ和Ⅷ在離體后會隨時間的延長而變性失活，這種失活可隨溫度的升高而加速。從而導致標本因從采集到分析時間延長而使PT和APTT時間延長。

    標本存放的溫度和時間的不同,可影響凝血因子活性。有文獻記載，32℃保存血漿6h、12h、24h，Ⅷ因子活性可分別消失50%、60%、95%。即使保存在4℃也分別消失5%、55%、70%。APTT在存放后檢測結果與即時測定結果相比均有延長趨勢。

    有文獻報道Ⅴ因子活性在32℃，在6h、12h、24h分別消失25%、40%、80%,而在4℃則僅損失0%、5%、10%。

    血液離體即開始變化，隨存放方式和時間不同，凝血因子逐漸消耗或激活，特別是V、Ⅷ、Ⅸ因子消耗和Ⅶ 因子的激活較為明顯.

標本常見錯誤對凝血結果的影響

1、引起凝固時間縮短的錯誤:

（1）穿刺不熟練，多次穿刺造成組織因子釋放，觸發外源凝血途徑活化；

（2）不適當的冷凍和融解血漿，造成因子Ⅶ的冷激活；

（3）試管中的氣泡造成的溶血；

（4）抗凝劑的量不準確。

2、引起凝固時間延長的錯誤：

（1）標本凝固造成凝血因子消耗；

（2）不適當的冷凍和融解血漿造成凝血因子的降解；

（3）抗凝劑的量不準確。

3、引起APTT時間延長的錯誤：

（1）標本中含有肝素；

（2）標本管未蓋塞子而導致CO2丟失，因而血漿pH發生改變，pH 的變化引起因子Ⅴ的變化。

4、引起APTT時間縮短的錯誤：

（1）用玻璃管儲存血漿引起因子Ⅻ的激活；

（2）標本針和試劑針位置偏移，位置偏移造成的樣本與試劑的量不準確。