幾種常用特殊PCR技術
(一)逆轉錄PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)
RNA經逆轉錄后可作為PCR的模板.逆轉錄PCR(RT-PCR)常用于基因表達研究(定量PCR)和逆病毒檢測.
設計RT-PCR引物時,應使引物分別位于不同的外顯子中,以便區別cDNA和gDNA擴增產物。
(二)多重PCR(Multiple PCR)
在同一PCR反應體系中用多對引物(覆蓋不同長度的靶序列)同時擴增。
例如用多重PCR進行DNA缺失篩選
(三) 套式PCR(nested PCR)
用第一次PCR擴增區域內部的第二對(套式)引物對第一次PCR產物再次擴增,可以增加特異性和靈敏度。
(四)非對稱PCR(asymmetric PCR)
在PCR反應體系中,限制引物之一的濃度(50-100:1)進行擴增,可得到單鏈PCR產物,可用于制備單鏈測序模板或單鏈DNA雜交探針。