凱氏定氮儀是依據經典凱氏定氮法設計的自動測定系統,根據蛋白質中氮的含量恒定的原理,通過測定樣品中氮的含量從而計算蛋白質含量。
凱氏定氮儀的操作注意事項
1、樣品前處理注意事項
樣品應是均勻的,大塊的固體樣品應用粉碎設備打得細小均勻,液體樣品應振搖或攪拌均勻。
固體樣品一般取樣范圍為0.20g~2.00g;半固體試樣一般取樣范圍為2.00g~5.00g;液體樣品取樣10.0mL~25.0mL(約相當氮30mg~40mg)。若檢測液體樣品,結果以g/100mL表示。
樣品放入定氮瓶內時,不要沾附頸上。萬一沾附可用少量水沖下,以免被檢樣消化不完全,結果偏低,或者用濾紙包裹好一起投入消化,濾紙影響通過空白扣除。
2、消化過程注意事項
消化過程中,確保濃硫酸量足夠,如樣品脂肪含量較高時,應適當增加硫酸量;定氮蒸餾器中樣品消化時,不要用強火。若樣品含糖高或含脂及較多時,注意控制加熱溫度,以免大量泡沫噴出燒瓶,造成樣品損失。可加入少量辛醇或液體石蠟,或硅消泡劑減少泡沫產生。在整個消化過程中保持和緩的沸騰,使火力集中在凱氏瓶底部,以免附在壁上的蛋白質在無硫酸存在的情況下,使氮有損失。
消化時應注意旋轉凱氏燒瓶,將附在瓶壁上的碳粒沖下,對樣品徹底消化。若樣品不易消化至澄清透明,可將燒瓶中溶液冷卻,加入數滴過氧化氫后,再繼續加熱消化至完全。
3、上機測定注意事項
儀器稀釋水采用中性去離子水;蒸汽發生瓶內的水必須保持酸性;硼酸吸收液配制時應用中性去離子水,避免堿性物質的混入,盛裝硼酸吸收液的容器應刷洗干凈;堿液應用中性去離子水配置;滴定用的標準酸必須按照標準配制和標定。
上機測試樣品前,應打開儀器預熱,放一支消化管空蒸一次,排除蒸餾管路中的空氣。
蒸餾時必須加堿,加入堿的作用一是中和硫酸,二是使溶液處于強堿性,這樣才能使 (NH4)2SO4變成NH3被硼酸吸收,通常是消化取用濃硫酸的四倍體積(40%NaOH)。硫酸銅可作為催化劑,并在蒸餾時作堿性反應指示劑,氫氧化鈉是否足量.可借助硫酸 銅在堿性條件下生成的褐色沉淀或深藍色的銅氨絡離子指示。若溶液的顏色不改變,則說明所加的堿液不足。
蒸餾是否完全,半自動凱氏定氮儀可用精密 pH試紙測冷凝管的冷凝液來確定,中性說明已蒸餾完全。全自動凱氏定氮儀目前主要是以蒸餾體積與設置時間(經驗值)確保蒸餾完全。
蒸餾結束后,滴定主要是是分為人工滴定和機器自動滴定計算和打印實驗結果。要求操作者根據實際情況,按照要求操作。
凱氏定氮儀安裝、操作簡單,被廣泛用于檢測糧食、食品、乳制品、飲料、飼料、土壤、水、藥物、沉淀物和化學品等中的氨氮、蛋白質氮等含量。
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