分光光度法測定解離常數的方法介紹

分光光度法是另一種常用的測定物質解離常數的方法。它是基于物質的分子狀態和離子狀態對某一波長光的吸收度不同的原理而建立起來的一種分析方法。當某種物質在溶液中達到解離平衡時，該溶液中同時存在物質的分子和離子狀態，而這兩種狀態對同一波長的光的吸收度是不同的，因此，用分光光度計測得的溶液的吸光度是溶液中分子和離子吸光度的綜合表現。若被測物是一元弱酸性物質，則其解離式為：

分光光度法對于測定在紫外--可見光區有較強吸收的物質的解離常數有很好的應用，同時也可以用來測定在紫外及可見光區吸收很弱（或無吸收）的物質的解離常數，但是此時需要在原來的基礎上加入指示劑。方海紅等 以硝基酚為指示劑采用分光光度法測定了延胡索乙素的解離常數，介紹了選擇分析波長和測定純物質分子和離子的吸光度的方法。

分光光度法適用范圍非常廣泛，操作簡單，結果準確可靠，是一種很好的測定物質解離常數的方法。它不但適用于離解或非離解形式紫外一可見吸收光譜顯著不同的化合物，還適用于低溶解度化合物及菲酸堿離解的情況。但是，分光光度法必須對每一種物質的酸性離解式、堿性離解式及弱酸弱堿式的吸光度逐一進行檢測，對于大量生物堿性離解常數的測定，工作量很大。另外分光光度法在用于測定酸堿指示劑及顯色劑類有機酸堿的pKa值時對工作波長的選擇有嚴格的要求。