以下是分光光度計的一般操作流程,不同型號和廠家的分光光度計可能會略有差異:
開機預熱:
連接好分光光度計的電源線,打開儀器開關。
讓儀器預熱一段時間,通常為 15-30 分鐘,具體時間可參考儀器說明書。預熱可以使儀器的光學系統和電子系統達到穩定狀態,確保測量的準確性 124。
準備工作:
準備好濾紙、擦鏡紙、廢液杯及洗瓶等用品,放在一旁備用 2。
根據實驗要求,選擇合適的波長。可以通過轉動波長調節器來設置所需的單色光波長 123。
選擇合適的比色皿。比色皿的材質(如石英、玻璃)和光程長度應根據樣品的性質和測量要求來選擇。確保比色皿干凈、無劃痕,如有必要,可使用去離子水或適當的清潔劑清洗比色皿,然后用干凈的無絨布擦干 18。
調零(空白校正):
輕輕旋動調 “0” 電位器,使讀數表頭指針恰好位于透光度為 “0” 處(此時,比色皿暗箱蓋是打開的,光路被切斷,光電管不受光照)18。
將盛蒸餾水(或空白溶液或純溶劑)的比色皿放入比色皿座架中的第一格內,把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上 18。

樣品測定:
輕輕拉動比色皿座架拉桿,使有色溶液進入光路,此時表頭指針所示為該有色溶液的吸光度A讀數后,打開比色皿暗箱蓋 18。
如果需要測量多個樣品,按照由稀到濃的順序依次進行測定,以減小測量誤差。每次測量前,可用待測溶液潤洗比色皿內壁幾次 18。
數據記錄與處理:
記錄下每個樣品的吸光度值或透過率值等測量數據。
根據實驗要求,對數據進行處理和分析,如繪制標準曲線、計算樣品濃度等。
關機:
實驗完畢,切斷電源 125。
取出比色皿,洗凈并倒置于濾紙上晾干,以備下次使用 123。
將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈 18。
在操作分光光度計時,還需要注意以下幾點:
拿比色皿時,手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污 18。
比色皿中的溶液不要裝得太滿,一般至比色皿高度的 3/4 處即可,防止過多溢出 2。
不要連續長時間光照,以防止光電管疲勞,在不測定時應將比色皿暗箱蓋打開,使光路切斷 18。
如果大幅度改變測試波長時,需等數分鐘后才能正常工作,因為波長由長波向短波或短波向長波移動時,光能量變化急劇,光電管受光后響應較慢,需一段光響應平衡時間 3。
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