LB固體培養基
Tryptone 1g
Yeast Extract 0.5g
NaCl 1g
Agar 1.5g
加蒸餾水至總體積為100ml,高壓蒸汽滅菌。滅菌后培養基不燙手時加入抗生素
2×YT培養基
Tryptone 1.6g
Yeast Extract 1g
NaCl 0.5g
加蒸餾水至總體積為100ml,高壓蒸汽滅菌
10×SDS-PAGE電泳緩沖液
Tris堿 60.4g
Glycine 376g
SDS 20g
先加1.3L水,溶解后蒸餾水定容至2L
蛋白脫色液
冰醋酸100ml, 甲醇100ml, H2O至1L
1×PBS緩沖液
NaCl 4g
KCl 0.1g
Na2HPO4 · 12H2O 1.79g
KH2PO4 0.12g
先溶于400ml蒸餾水中,調PH值7.3,加水定容至500ml,高壓滅菌
10×PBS配置直接將相應的成分×10,配制方法相同
Tris-Cl(1M)
用800ml蒸餾水溶解121.1g Tris base,加濃鹽酸調PH至所需值
應使溶液冷至室溫后,方可最后調定pH值。加水定容至1L。分裝后高壓蒸
汽滅菌。Tris溶液的pH值因溫度而定,溫度每升高1C,pH值大約降低0.03單位
6×SDS sample buffer
甘油(100%) 30ml
TrisCl(pH 6.8,1.0M) 15ml
EDTA(powder) 0.22g
SDS(powder) 6g
溴酚藍 0.03g
DTT 0.6 mol/L
Store in aliquots at -20C
也可保存于室溫,但是使用前加入1/20體積的巰基乙醇,使ME終濃度為715 mM
配制時用沸水浴或電磁攪拌器加熱,燒杯頂部用錫紙封閉,防止水分蒸發
過濾除菌
30%丙烯酰胺
丙烯酰胺 60g
亞甲雙丙稀酰胺 1.6g
加蒸餾水至200ml
TrisCl pH 8.8(1.5mol/L)
在50ml蒸餾水中溶解18.2g Tris base,用1mol/L HCl調pH至8.8,補加蒸餾水至100ml。4度保存
TrisCl pH 6.8 (1.0mol/L)
在50ml蒸餾水中溶解12.1g Tris based,用HCl調pH至6.8,定容至100ml
10%過硫酸胺(AP)
1g AP溶于10ml蒸餾水中。4C不能長期存放,一般2-3周
10%SDS
稱取20gSDS慢慢轉移到約含150ml的水的燒杯中,用磁力攪拌器攪拌直至完全溶解。用水定容至200ml
IPTG(1 M)
用8ml蒸餾水融解2.38g IPTG配制成1 M的溶液,用蒸餾水定溶至10ml。用0.22um過濾器過濾除菌,store -20C