分子生物學實驗室的常規儀器設備及有關操作（一）

【實驗目的】
 （1）了解實驗的常規儀器、設備、耗材。
 （2）掌握本實驗所用儀器的功能和使用方法。

 【實驗內容】
 一、驗室的常規儀器、設備

 (一) 溫度控制系統：
 1. 冰箱: 根據藥品、試劑及多種生物制劑保存的需要，必須具備不同控溫級別的冰箱，最常使用的有：4℃、-20℃、-80℃冰箱。
 4℃適合儲存某些溶液、試劑、藥品等。
 -20℃適用于某些試劑、藥品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白質樣品等。
 -80℃適合某些長期低溫保存的樣品、純化的樣品、特殊的低溫處理消化液等的保存。
 0-10℃的冷柜適合低溫條件下的電泳、層析、透析等實驗。
 2．液氮罐：有些實驗材料、某些器官組織、細胞株、菌株及純化的樣品等，要求速凍和長期保存在超低溫環境下，就需要一個液氮罐（-196℃）具有經濟、省力和較好地保持細胞生物學特性的優點。
 3．培養箱：37℃恒溫箱用于細菌的固體培養和細胞培養。
 CO2培養箱適用于培養各種細胞，可恒定地提供一定量的CO2（通常5%），用來維持培養液的酸度（pH值）。
 37℃恒溫空氣搖床可進行液體細菌的培養。
 4. 水浴鍋：用于保溫。
 25-100℃水浴搖床可用于分子雜交試驗，各種生物化學酶反應等試驗的保溫。
 25-100℃水浴箱用于常規試驗。
 5.
 烘箱：主用于烘干實驗器皿，有些需要溫度高些，有些需要溫度低些。用于RNA方面的實驗用具，需要在250℃烤箱中烘干，有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中進行烘干。

 （二）水的凈化裝置：隨著分子生物學的飛速發展，許多實驗對水純度的要求越來越高。
 1. 蒸餾水皿：單蒸水常難以滿足實驗要求。雙蒸水、三蒸水配液，許多實驗要去離子水。
 多次蒸餾水可除去水中揮發性雜質，不能完全除去水中溶解的氣體雜質（Mn2+、Cu2+、Zn2+、Fe3+、Mo(Ⅵ)）。
 2. 離子交換器：去離子水—用離子交換法制取的水，稱去離子水。
 去離子效果好，但不能除去水中的非離子型雜質，其中常含有微量的有機物（樹脂等）。
 3．超純水：用蒸餾水、離子交換水、反滲透純水做為供水，磁鐵耦合齒輪泵作用使水循環。用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA測序、酶反應、組織和細胞培養等。

 （三）菌消毒設備：分子生物學所用大部分試劑，而且實驗用具都應嚴格消毒滅菌。。
 1．蒸汽消毒鍋：用于小批量物品的隨時消毒。大批實驗物品、試劑、培養基可使用大型消毒且定時進行消毒
 2. 紫外線：75%乙醇 、0.1%SDS（消毒劑）
 一些耐高壓、高溫消毒且可用紫外線照射或乙醇和SDS浸泡。
 紫外線照射使用方便，且很方便，但滅菌效果與距離有關，且產生臭氧污染安全，用于無菌室，超凈臺和塑料用具的消毒。
 3. 濾器濾膜：不耐高溫、高壓的試劑用其處菌。
 4. 煮沸消毒：主用于金屬器械和針急需時采用。

（四） 計量系統：
 1. 稱量系統：（各種天平）臺秤、托盤天平、鈕力擺動天平、
 光電分子天平、精密電子分析天平
 2. 液體體積的度量：精：量筒、移液管、微量取液器
 粗：刻度試管、燒杯、錐形瓶
 3. pH值測量：
 pH計：測定溶液中H+的直接電位的儀器，主要通過一對電極，在不同的pH溶液中產生不同的電動勢用pH值表示出來。
 pH試紙：只適用于培養液、酚飽和液、緩沖液或其它試劑溶液的pH值的粗略估計。而大部分試劑的配制要求嚴格的pH值，需精確度高（小數點后兩位）的pH計。
 4.
 OD值測量：光密度、分光光度計是利用物質在可見光和紫外線區域中的吸收光譜來鑒定該物質的性質及其含量的一種儀器。它是由光源、單色器、吸收池、接收器、測量儀表或顯示屏幕所組成。OD值是許多溶液中溶質定量的方便指標之一，通過所產生的單色光而測定某一溶液對該單色光的吸收值，利用它可進行核酸溶液定量和純度的初步判斷。

 （五）離心機：離心技術是研究生物的結構和功能中不可缺少的一種物理技術手段。因為各種物質在沉淀系數、浮力、和質量等方面有差異，可利用強大的離心力場，使其分離、純化和濃縮。目前有各種各樣的離心機。可供少于0.05ml到幾升的樣品離心之用。離心技術應用廣泛，包括收集和分離細胞、細胞器和生物大分子等。據其轉速的不同，可分為以下幾種類型：
 1. 普通離心機：最大轉速6000 r/m ，最大離心力6000g
 ①醫用或臺式離心機：是離心機中最簡單而廉價的，最常用于收集快速沉降系數的物質，如紅細胞、粗大的沉淀物、酵母菌和細菌等。
 ②低速冷凍離心機：主要用于細胞、細胞核、細胞膜和細菌的沉淀和收集等。 2
 2. 高速離心機：最大轉速25000 r/m ，最大離心力89000g
 有冷凍和常溫兩種，多用于制備和手收集微生物、細胞碎片、細胞、大的細胞器、硫酸銨沉淀物以及免疫沉淀物等。
 3. 超速離心機：最大轉速9000 r/m ，最大離心力694000g。
 4. 臺式超速離心機：最大轉速12000r/m ，最大離心力625000g。