分子熒光光度法測定二氯熒光素
實驗實驗中修改部分
一、實驗目的:1、(書)
2、掌握熒光分光光度計的結構及基本使用方法
3、熟悉熒光分光光度計的應用
二、方法原理:(書)
三、儀器和試劑:
儀器:Cary/Eclipse熒光分光光度計。該儀器使用氙弧燈作為激發光源。在190~900nm的連續光譜區內進行工作。具備先進的結構性能和高效的工作效能。儀器包括激發單色器和發射單色器、氙光源;固定寬度范圍的可調狹縫、可調光柵;以及兩個光電備增管作為檢測器。一次實驗可設置測試多種樣品,并對同一種樣品作多次測試,實驗過程均通過聯機電腦的工作站進行數字化控制,精度高、重復性好!在環境條件允許的情況下,該儀器還可用于生物—化學發光的檢測、磷光的檢測。
試劑:(書)
四、實驗步驟:
1、 配制標準溶液(按書中要求配制)
2、 接通電源,打開聯機電腦,開啟儀器開關。
3、 待儀器穩定后,進行參數設置。
(1) 選擇熒光的檢測模式
(2) 設置激發波長 500nm 發射波長520nm
(3) 設置激發狹縫寬5nm 發射狹縫寬 5nm
(4) 設置激發光柵狀態 open
(5) 設置待測溶液的單位
(6) 設置待測標準樣品個數 5
(7) 設置重復檢測樣品次數1
(8) 設置最小R2 0.95
(9) 設置待測樣的個數及其重復檢測次數1
(10) 設置報告模式
(11) 設置自動存貯模式為自動存貯off
4、 測定標準溶液和待測樣溶液的熒光強度
5、 測定過程應將擋板關閉
五、結果處理