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  • 發布時間:2020-02-19 22:36 原文鏈接: 分析儀器操作指南(二)

    三聚氰胺奶粉事件與凱氏定氮儀

    2008年的“三聚氰胺”毒奶粉事件中,三聚氰胺之所以能“冠冕堂皇”地躲過安全檢測,就是由于我們食品檢測過程中檢測蛋白質含量是用“凱式定氮法”來檢測的,簡單來說就是以食品中的含氮量計算出蛋白質的含量。而三聚氰胺由于含氮量高,所以被不法商家添加進奶粉中,提高含氮量來冒充高蛋白奶粉。

    儀器簡介

    凱氏定氮儀是根據蛋白質中氮的含量恒定的原理,通過測定樣品中氮的含量從而計算蛋白質含量的儀器。因其蛋白質含量測量計算的方法叫做凱氏定氮法,故被稱為凱氏定氮儀,又名定氮儀、蛋白質測定儀、粗蛋白測定儀。

    中文名:凱氏定氮儀

    又 名:定氮儀、蛋白質測定儀

    測量范圍:0.1~200mg

    氮回收率:99.5%

    圖 凱氏定氮儀

    原理

    蛋白質是含氮的有機化合物。食品與硫酸和催化劑一同加熱消化,使蛋白質分解,分解的氨與硫酸結合生成硫酸銨。然后堿化蒸餾使氨游離,用硼酸吸收后再以硫酸或鹽酸標準溶液滴定,根據酸的消耗量乘以換算系數,即為蛋白質含量。

    1.有機物中的胺根在強熱和CuSO4,濃H2SO4 作用下,硝化生成(NH4)2SO4

    反應式為:

      2NH2+H2SO4+2H=(NH4)2SO4 (其中CuSO4做催化劑)

    2.在凱氏定氮器中與堿作用,通過蒸餾釋放出NH3 ,收集于H3BO3 溶液中

    反應式為:

      (NH4)2SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO4

      2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2

    3. 用已知濃度的H2SO4(或HCI)標準溶液滴定,根據HCI消耗的量計算出氮的含量,然后乘以相應的換算因子,既得蛋白質的含量

    反應式為:

      (NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=(NH4)2SO4+4H3BO3

      (NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3

    有機物結構分析與紅外色譜儀

    我們第一次聽到紅外色譜儀這個名字的時候,應該都是化學教科書上說的它可以用來檢驗有機物的官能團,原理是因為不同的結構對紅外光有不同程度的吸收,體現在譜圖上就可以用來分析。

    儀器分類

    1.棱鏡和光柵光譜儀

    屬于色散型光譜儀,它的單色器為棱鏡或光柵,屬單通道測量,即,每次只測量一個窄波段的光譜元。轉動棱鏡或光柵,逐點改變其方位后,可測得光源的光譜分布。

    圖 光柵光譜儀

    隨著信息技術和電子計算機的發展,出現了以多通道測量為特點的新型紅外光譜儀,即在一次測量中,探測器就可同時測出光源中各個光譜元的信息,例如,在哈德曼變換光譜儀中就是在光柵光譜儀的基礎上用編碼模板代替入射或出射狹縫,然后用計算機處理探測器所測得的信號。與光柵光譜儀相比,哈德曼變換光譜儀的信噪比要高些。

    2.傅里葉變換紅外光譜儀

    它是非色散型的,核心部分是一臺雙光束干涉,常用的是邁克耳孫干涉儀。當動鏡移動時,經過干涉儀的兩束相干光間的光程差就改變,探測器所測得的光強也隨之變化,從而得到干涉圖。經過傅里葉變換的數學運算后,就可得到入射光的光譜B(v)。

    傅里葉變換光譜儀的主要優點是:

    ①多通道測量使信噪比提高;

    ②沒有入射和出射狹縫限制,因而光通量高,提高了儀器的靈敏度;

    ③以氦、氖激光波長為標準,波數值的精確度可達0.01厘米;

    ④增加動鏡移動距離就可使分辨本領提高;

    ⑤工作波段可從可見區延伸到毫米區,使遠紅外光譜的測定得以實現;

    ※上述各種紅外光譜儀既可測量發射光譜,又可測量吸收或反射光譜。當測量發射光譜時,以樣品本身為光源;測量吸收或反射光譜時,用鹵鎢燈、能斯脫燈、硅碳棒、高壓汞燈(用于遠紅外區)為光源。所用探測器主要有熱探測器和光電探測器,前者有高萊池、熱電偶、硫酸三甘肽、氘化硫酸三甘肽等;后者有碲鎘汞、硫化鉛、銻化銦等。常用的窗片材料有氯化鈉、溴化鉀、氟化鋇、氟化鋰、氟化鈣,它們適用于近、中紅外區。在遠紅外區可用聚乙烯片或聚酯薄膜。此外,還常用金屬鍍膜反射鏡代替透鏡。

    熒光與熒光分光光度儀

    我們都知道熒光絢爛多彩,正因為人們愛它的美麗,便有了熒光粉、熒光筆、熒光棒,產品多不勝數。可是你可能不知道的是,熒光的產生卻是因為分子躍遷產生的。科學家利用了熒光的相關性質,發明了熒光分光光度計,用來檢測材料,在生物化學、生物醫學、環境化工中有著重要的應用。那我就給你介紹一些這個儀器。

    儀器分類

    熒光分光光度計的發展經歷了手控式、自動記錄式、計算機控制式三個階段;還可分為單光束式和雙光束式兩大系列。其他的還有低溫激光Shpol’skill熒光分光光度計、配有壽命和相分辯測定的熒光分光光度計等。

    儀器組成

    1.光源

    為高壓汞蒸氣燈或氙弧燈,后者能發射出強度較大的連續光譜,且在300nm~400nm 范圍內強度幾乎相等,故較常用。

    2.激發單色器

    置于光源和樣品室之間的為激發單色器或第一單色器,篩選出特定的激發光譜。

    3.發射單色器

    置于樣品室和檢測器之間的為發射單色器或第二單色器,常采用光柵為單色器。篩選出特定的發射光譜。

    4.樣品室

    通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)組成。測量液體時,光源與檢測器成直角安排;測量固體時,光源與檢測器成銳角安排。

    5.檢測器

    一般用光電管或光電倍增管作檢測器。可將光信號放大并轉為電信號。

    圖 熒光分光光度計

    功能特點

    1.熒光發射光譜

    選擇某一固定波長的光激發樣品,記錄樣品中產生的熒光發射強度與發射波長間的函數關系,即得熒光發射光譜。

    2.熒光激發光譜

    選定某一熒光發射波長記錄熒光發射強度作為激發光波長的函數,即得熒光激發光譜。

    3.時間分辨技術

    可用于對混合物中光譜重疊但有壽命差異的組分進行分辨并分別測量。


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