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  • 發布時間:2020-05-12 18:59 原文鏈接: 分析苯基尿素類殺蟲劑的實驗方法

      色譜流動相的制備:

      1M甲酸銨溶液:稱取63g甲酸銨,溶于1L HPLC級的水中。

      流動相A:在1L水 (HPLC級) 中加入5mL 1M 甲酸銨溶液。

      流動相B:在1L甲醇 (HPLC級) 中加入5mL 1M 甲酸銨溶液。

      樣品制備(水果與蔬菜基質)

      基于Anastassiadies等人提出的方法[1]:

      1. 稱量10g切碎的樣品;

      2. 加入100μL內標溶液(D5 -Atrazine 1μg/mL);

      3. 加入10mL乙腈,劇烈振搖;

      4. 加入4g無水MgSO4和1g的NaCl;

      5. 馬上渦旋混合,以防止MgSO4共聚物的生成;

      6. 振搖30s后,4300r/min離心5min;

      7. 取出1mL初提液,轉移至含有150mg無水MgSO4的離心管中;

      8. 混合,5200r/min離心1min;

      9. 取出500μL上清液,用水將稀釋到1mL,得到提取液濃度約為0.5g/mL

      基于Klein和Alder等人提出的方法[2, 3]:

      1. 在5g或10g樣品中,加入水到10mL;

      2. 加20mL甲醇,使用UltraTurrax 組織勻漿機勻漿2min;

      3. 有時需要過濾或離心;

      4. 加入NaCl溶液 (100mL水中含20g NaCl),每6mL加入NaCl溶液2mL;

      5. 用5mL樣品溶液浸泡 ChemElut 柱;

      6. 5min后,用16mL二氯甲烷洗脫;

      7. 40℃揮發至干;

      8. 用甲醇與水的混合溶液1.25mL (甲醇0.25mL,水1mL) 重新溶解;

      9. 用0.45μm濾膜過濾。

      基于Lehotay et al.[4]提出的方法:

      1. 使用Molinex 混合器或類似設備勻質水果或蔬菜樣品;

      2. 加入乙腈, (15.0 ± 0.05) g勻質的樣品加乙腈15mL,超聲提取2min后,混旋5min;

      3. 加入6g無水MgSO4和1.5g NaCl的混合物,劇烈振搖1min;

      4. 3000r/min離心5min;

      5. 取5mL上層溶液,加入1.8g 無水MgSO4和0.3g Bondesil C8 吸附劑;

      6. 振搖20s;

      7. 使用Eppendorf 5301型濃縮儀,或類似設備揮發至干;

      8. 用乙腈/水=1/9的溶液1mL重新溶解樣品;

      9. 12000r/min 高速離心2min;

      10. 上清液轉入自動進樣器的進樣瓶中備用。

      色譜分離條件

      Agilent 1100 系統:G1312A二元泵系統、G1367A型自動進樣器、柱溫箱。

      色譜柱:Phenomenex Synergi Fusion-RP反相柱,50mm×2mm,4μm,內孔 80?。

      流動相:A相—水+5mM甲酸銨;B相—甲醇+5mM甲酸銨。

      梯度設置:

      MS/MS 檢測

      API 3200?或3200 QTRAP? LC-MS/MS液質分析系統。TurboIonSpray? 離子源,負離子模式,MRM掃描方式。


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