判斷PCR陽性標準

一、條帶寬不超過1mm，邊緣整齊；

二、條帶在期望的堿基大小之內；

三、背景上無smears,也無引物二聚體的出現則是PCR擴增失敗，而非陰性反應；

四、如果出現期望的堿基大小之外的其它條帶，不管是否有期望大小的條帶，均應作為人工假像看待；

五、在臨床標本檢測時，尤其對于腫瘤標本，除預期條帶外，經常有以外條帶或smear現象，但只要其亮度明顯低于目的條帶，也應視為陽性；

六、對于某些情況，尤其在自己設計引物時，如果經費允許，還是應該抽樣測序驗證。因為用一對引物擴出同一家族不同成員的情況也是有的，如果恰巧這些成員長度相等，則用上述原則無法判別。比如當我在擴MAGEs基因時，曾經一對引物擴出其家族的6個成員，產物均是1000bp左右。實際是MAGE1-6,要是你的原則，那都是MAGE3了。還有我曾用一對引物擴出小鼠，大鼠，兔，人，豚鼠的IgG 1Fc產物均為750bp；

七、陰性反應我理解為:由于模板的不存在而使PCR擴增失敗。所以是否陰性反應還應和陰性對照相比較。陰性反應沒有二聚體和Smaer現象情況并不少見；當然zui常見的情況還是二聚體和Smear現象(我們這稱為“大馬路”)；

八、條帶整齊就可以了，1mm的標準無法實施，條帶越小，膠越稀，跑得越遠，帶越寬。做這些試驗，往往是研究生，新手上路，不必要求太嚴格了。