利用ImageXpress Micro進行長時間活細胞成像和心肌細胞功能評價
活細胞成像技術是最近幾年興起的一項技術,能夠在細胞接近生理的狀態下觀察細胞形態改變和蛋白的表達,該技術能夠避免傳統采用固定細胞或組織的研究方法中,固定細胞過程中造成的細胞形態的改變和結構改變,能夠更加真實的反映出細胞的特性,因而廣受推崇。MD ImageXpress Micro高內涵系統具有多種特性能夠進行長達數天的活細胞的觀察,同時,由于采用著名的MD軟件產品MetaMorph為基礎的MetaXpress高內涵分析軟件,具有極高的靈活性和擴展能力,除活細胞成像之外還能夠能夠對某些細胞(如心肌細胞)的生理藥理特性進行評價。
神經細胞長時間成像
神經細胞是公認的較為敏感和脆弱的細胞,對于外界環境較為敏感。對于活的神經細胞的長時間培養和觀察具有較大困難。采用ImageXpress Micro系統能夠實現神經細胞的長時間觀察培養。
方法:
從新生大鼠大腦海馬獲得約1立方毫米大小組織塊。移入含有0.25%胰酶的離心管中37℃,5%CO2 孵育箱內消化20~30 min。加入含胎牛血清的培養液終止消化,離心重懸細胞,按0.6×105/ml 鋪于96 孔板中。24 h 后換為NeurolbasalMedium/B27 無血清培養液,以后每2~3 d 半量換液1 次。7 d 后獲得原代神經細胞。
圖像獲取:
將樣品放入有環境控制功能的MD ImageXpress Micro高內涵系統內,采用激光自動聚焦進行樣品聚焦,在10X物鏡下每隔5分鐘進行一次相差圖像拍攝,結果如下:


小結:
ImageXpress Micro采用的環境控制系統能夠維持細胞所需的溫度、濕度和CO2條件,其中溫度為細胞的酶活性提供了溫度保障,確保細胞的生理機能,濕度維持能夠保證細胞外液不會蒸發,避免了胞外滲透壓的升高造成的細胞脫水,CO2能夠維持細胞外液的pH值。
除了維持細胞的生存環境外,在進行敏感、脆弱細胞(如神經細胞)的長時間觀察過程中,最為重要的是減小對細胞的刺激,盡可能的保持細胞的活性。ImageXpress Micro采用激光自動聚焦技術,在聚焦的過程中,細胞無需受到光照,這樣就避免了細胞內的光化學反應和光照升溫,能夠很好的維持細胞的活性狀態。因此,在長時間活細胞的觀察過程中,以上兩點不可或缺。