制備液相色譜法分離純化刺萼龍葵中化感物質黃酮苷

次生代謝物質是指植物體內除糖類、蛋白質、脂類等生長發育必需的物質以外的有機物質,如生物堿、黃酮類等。這些次生代謝產物對植物抗病蟲害,防御天敵,并通過化感作用提高種間競爭力等方面具有重要作用。刺萼龍葵,又名黃花刺茄(Solanum Rostratum),是一種入侵性極強的有毒雜草,其主要通過自身產生的化感物質對環境產生影響。

可見,采用合適的方法確定刺萼龍葵中的化感物質很有必要。經過調查和研究,刺萼龍葵中黃酮苷類物質是其產生化感作用的主要原因,因此本文建立雙水相浮選-制備液相色譜法分離純化入侵植物刺萼龍葵中的黃酮苷。在樣品前處理部分,目標物采用雙水相浮選的方法進行分離和富集。用PEG1000的乙醇溶液(w:w=1:1)作浮選溶劑,溶液p H為4,硫酸銨濃度為350 g/L,氮氣流速為40 m L/min,浮選時間為30 min,浮選溶劑的體積為10 m L,浮選次數為2次,在室溫下得到了目標物濃度較高的粗品;再采用制備液相色譜純化浮選產物,收集兩個色譜峰所對應的洗脫物,經分析型高效液相色譜檢測,確定其純度分別達到了98.1%和99.0%。用NMR和LCMS-IT-TOF鑒定其化學結構,得知化合物1為金絲桃苷,化合物2為紫云英苷、異鼠李素-3-o-半乳糖苷和異鼠李素-3-o-葡萄糖苷的混合物。之后,降低溫度,更換色譜柱和流動相,再次采用制備液相色譜將化合物2進一步分離純化,得到了純度分別為93.8%,97.1%和99.2%的紫云英苷、異鼠李素-3-o-半乳糖苷和異鼠李素-3-o-葡萄糖苷。雙水相浮選-制備液相色譜可以高效分離刺萼龍葵中黃酮苷類物質,該方法對于入侵植物中化感物質的研究和有效利用具有重要意義。