我覺得你做western不夠規范。1、貼壁細胞刮下來或消化下來都可以2、PMSF一般配成100 mmol/L的儲備液（乙醇或異丙醇溶解），然后按1:100稀釋到裂解液里，終濃度是1 mmol/L。3、跑蛋白時，除非你是做表達或看條帶有無的，一般都要定量啊，用bcakit或者考馬斯定量（后者不是很準，但便宜），至于多少細胞加多少裂解 液，一般要靠經驗，我主要是看細胞離下來體積的大小決定加多少裂解液的。上樣緩沖液有配方的，網上都可以查到。4、考馬斯亮藍染蛋白是有靈敏度限制的，好像是10 g吧，在網上能查到，對了，還要排除考染的步驟和配方，園子里有很多不錯的帖子可以借鑒。