對營養和環境的要求與微生物培養不同主要是：
①營養條件
動物細胞的培養一般需要氨基酸、維生素、鹽類、葡萄糖（有時加半乳糖）、血清。血清能提供細胞生長所必需的微量元素和生長因子。由于血清來源受到限制，質量不穩定，現在正在研究開發血清替代物和無血清培養基。
②環境條件
與微生物相比，動物細胞培養對環境條件的要求較苛刻,監測和調節的難度較高。培養基的pH對細胞附著、生長和分布都很敏感,一般控制在±0.05。溫度一般要求控制在<±0.25℃。有時為了達到良好的換熱目的，培養罐采用錐形結構。通氣方法可采用插入培養基中的硅橡膠管，靠擴散作用來完成氧的傳遞，或將氣體通入裝在培養基液面上空的分布器內，氧通過擴散和表面卷吸進入培養基內。