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  • 發布時間:2019-04-05 21:28 原文鏈接: 動物細胞培養——以干粉配制培養基儲液并過濾滅菌

    實驗方法原理目的

    制備復雜溶液及熱不穩定試荊和培養錢的滅曲

    訓練目標

    過濾的技術和容址的正確選擇。比較正壓和負珠過濾,監督:指導培養幕的制備。在過濾的初始階段連續監督,在過濾過程中間歇監份,在抽樣質量控制時連續監督。

    時間:2h。

    背景信息

    以干粉配制培養地儲液(見方案11.9).過濾滅菌(見11.5.2節.方案11.12);可供選擇的步驟(見方案11.11, 11,13, 11.14)。

    示范材料和操作:一次性濾器和反復裝配使用濾器的容最,最好有實物,如果沒有,照片也可以.強調濾器尺寸(表面積)的概念。正壓/負樂濾器的原理和優缺點(見11.5.2節)。示范濾器的操作,過濾、收集、抽樣質控。
    實驗步驟

    練習

    概要

    在超純水中溶解粉末,過濾滅菌,分裝到試劑瓶,抽樣進行無菌測試。

    標準方案

    1)以粉未配制培養篆(見方案11.9)。
    2)用真空過濾器過濾滅菌450 ml 培養基(見方案11.12)。

    3)用正壓過濾器過濾滅菌550 ml 培養基(見方案11.13)。

    補充方案:特殊培養基的配制(見方案11.10);高壓滅菌培養基(見11.5.1節);可反復使川的滅菌濾器(見11.3.6竹);使用注射式濾器的過濾滅菌(見方案11.11).

    用大型直線式過濾器過雄滅菌(見方案11.14);血清(見11.5.3節;方案n.15)。

    實驗變化

    將溶解的培養基分成兩份.用正壓過濾器過濾滅菌550ml培養基(見方案11.13),用負壓過濾器過濾滅菌45oml培養基(見方案11.12)。

    背景:C(入和碳酸氧鹽(見9.2.2節);緩沖液(見9.2.3竹);標準滅菌方案(見11.5竹)。

    數據

    l)注意過濾之前和之后瞬時的pH.


    2)在37t孵育普通的容器或試劑瓶1周,檢在污染物。

    分析

    1)解釋真空過濾器和正壓過建器過濾的培養基pH的不同。

    2)儲存一段時間后pH是否會恢復?

    3)何時要有選擇的使用培養幕?

    4)你會選擇什么樣的濾器

          a)過濾 5ml 結晶的溶液?

          b)過濾 10L 培養基?

           c)過濾 1L 血清?

    展開 


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