能產生化學發光的反應，通常應滿足三個條件：①具有足夠的能量使電子躍遷到激發態；②有利于電子激發態產生的化學機理；③電子激發態產物本身會發光或者將能量傳遞給會發光的分子。由此可見，化學發光效率 (φCL)與電子激發態的生成效率(φex)及發光效率(φL)有關。發光效率(φL)則應包含能量轉移過程的效率。φCL、φex和φL三者分別表示為：
它們三者之間的關系如下： φCL=φex·φL
化學發光強度 (ICL)取決于化學發光效率(φCL)和單位時間內反應的分子數(dc/dt)： ICL=φCL·dc/dt
通常，由于反應過程中反應物的消耗，發光強度將隨反應時間的延長而下降。進行分析時，反應要在一定的條件下進行，以使發光強度與待測反應物的濃度之間具有確定的函數關系。