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  • 發布時間:2022-08-30 15:52 原文鏈接: 化學發光探針技術的操作

      利用化學發光雜交保護分析的原理檢測空腸彎曲菌、單核細胞增生性李斯特氏菌、大腸桿菌O157和金黃色葡萄球菌4種致病菌特異性RNA序列,這種方法無需物理分離,利用吖啶酯標記DNA探針,通過核酸雜交保護分析法,即應用人工合成的靶DNA保守區的寡 核苷酸,在合成時引入一個烷氨基的手臂,經活化后接上吖啶酯,制成化學發光探針。

      雜交后無需分離步驟,而是利用差分水解來鑒別,即加入堿性溶液,游離的發光探針遇堿水解失去發光特性,而與特異性目的片段結合的探針形成DNA-RNA雜交體,由于吖啶酯是平面結構很容易進入雙螺旋的內部而獲得雜交保護,水解速度緩慢(半衰期達10分鐘以上),仍有發光性能,可以在發光儀上顯示化學發光信號,從而實現對病原菌的檢測。

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