化學法測定DNA含量可以用于：（1）轉化、轉染之前的質粒濃度估測；（2）對獲取的DNA含量進行檢測。
| 實驗方法原理 | DNA 在酸性條件下加熱，其嘌呤堿與脫氧核糖間的糖苷鍵斷裂，生成嘌呤堿、脫氧核糖和脫氧嘧啶核苷酸，而2-脫氧核糖在酸性環境中加熱脫水生成ω-羥基-γ-酮基戊糖，與二苯胺試劑反應生成藍色物質，在595nm 波長處有最大吸收。DNA 在40-400μg 范圍內，光吸收與DNA的濃度成正比。在反應液中加入少量乙醛，可以提高反應靈敏度。 |
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| 實驗材料 | |
| 試劑、試劑盒 | |
| 儀器、耗材 | |
| 實驗步驟 | 1. 制作DNA 標準曲線：取12 支潔凈干燥試管加入DNA標準溶液，加完各試劑后，充分混勻。于60℃水浴中保溫1h,冷卻后于595nm 波長處以1,2 管為空白調零，測定各管光密度（OD595nm）。取兩管的平均值，以DNA 的含量為橫坐標，光密度為縱坐標，繪制標準曲線。 2. 樣品DNA 含量測定：取2 支干凈試管 加入樣品試劑，其它操作同上。待測溶液中的DNA 含量應調整至標準曲線的可讀范圍內。 3. DNA 含量計算：以樣品的光密度，從標準曲線上查出相對應DNA 含量，計算出樣品中DNA 的百分含量。 |
| 注意事項 | 二苯胺試劑具有腐蝕性，且二苯胺反應產生的藍色不易褪色，操作中應防止灑出，比色時，比色杯外面一定要擦干凈。 |
| 其他 | 二苯胺主要用于合成橡膠的防老劑、燃料和醫藥中間體，潤滑油抗氧劑，也是火藥的穩定劑。硝酸鹽、氯酸鹽和其他氧化性物質的檢定。銥的催化測定。硝酸鹽的光度測定。氧化還原指示劑。單倍體育種培養基。制造染料。是硝化纖維素、炸藥、火棉的穩定劑。 |